Биохимический анализатор AU480. Руководство - часть 4

PN B40293AA

3-1

ГЛАВА 3

Описание системы

В данной главе описаны общие принципы работы системы. Она знакомит также с основными
процессами, которые объясняются в последующих главах настоящего руководства
пользователя.

Кроме того, здесь описана аппаратная часть системы. Это позволит лучше понять
техническую структуру системы.

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

3.1.1 Реагент-бланк

3.1.2 Анализ по конечной точке

3.1.3 Кинетический анализ

3.1.4 Анализ по фиксированным точкам

3.1.5 Контроль качества

3.1.6 Краткая сводка по типам калибровки

3.1.7 Метод ISE, принципы измерения

3.1.8 Принцип проверки с использованием водного бланка в режиме реального
времени

3.2 Основные процессы

3.2.1 Компьютер

3.2.2 Идентификация пробы

3.2.3 Перенос пробы

3.2.4 Перенос реагента

3.2.5 Смешивание реакционной жидкости

3.2.6 Инкубация реакционной жидкости и промывка

3.2.7 Фотометрическое измерение

3.2.8 Анализ по сети и анализ с использованием значений, введенных с клавиатуры

3.2.9 Идентификация пробы. Дата и время

PN B40293AA

3-2

Описание системы

3.3 Обращение с реагентами, калибраторами и контролями и основные сведения о них

3.3.1 Реагенты

3.3.2 Дилюент для пробы

3.3.3 Калибратор

3.3.4 Проба для контроля качества

3.3.5 Материал для контроля качества ISE

3.4 Основные сведения об оборудовании системы

3.4.1 Выключатели и предохранитель

3.4.2 Кнопки управления

3.4.3 Блок транспортера штативов

3.4.4 STAT-ротор

3.4.5 Блок переноса проб

3.4.6 Блок переноса реагентов

3.4.7 Блок мешалки

3.4.8 Блок карусели для кювет

3.4.9 Блок фотометрии

3.4.10 Моющая станция

3.4.11 Реагентный отсек

3.4.12 Блок шприцев

3.4.13 Отсек для бачков

3.4.14 Перистальтический насос для промывочного раствора

3.4.15 Блок ISE (опция)

3.4.16 Блок обработки данных (DPR)

3.4.17 Сенсорный экран, мышь и клавиатура

3.5 Описание программного обеспечения

3.5.1 Структура рабочего окна

3.5.2 Основная панель кнопок

3.5.3 Кратко о кнопке «Главный экран»

3.5.4 Структура и краткое описание списка меню

3.5.5 Обзор меню пользователя

3.5.6 Работа с интерактивной справкой

3.5.7 Режимы анализатора

PN B40293AA

3-3

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Данная система производит автоматический анализ сыворотки, мочи и других жидкостей.
Она определяет компоненты пробы и автоматически выдает результаты анализа.

В этом разделе кратко описаны принципы анализа проб системой AU480. Дано также
описание метода измерения ISE.

3.1.1 Реагент-бланк

3.1.2 Анализ по конечной точке

3.1.3 Кинетический анализ

3.1.4 Анализ по фиксированным точкам

3.1.5 Контроль качества

3.1.6 Краткая сводка по типам калибровки

3.1.7 Метод ISE, принципы измерения

3.1.8 Принцип проверки с использованием водного бланка в режиме реального времени

3.1.1 Реагент-бланк

Измеряемая величина (оптическая плотность (OD) реакции) вычисляется путем вычитания
OD реагент-бланка (OD реагента в каждой фотометрической точке P0—P27) и значений OD
деионизированного водного бланка (данные фотокалибровки) из измеряемой OD пробы,
вступающей в реакцию с реагентом.

Измеряя реагент-бланк, можно получить значения OD реагент-бланка (РБ) во всех
фотометрических точках, показанных на следующем рисунке.

При измерении реагент-бланка используется синий штатив. Чтобы запрограммировать
позицию 1 и 2 синего штатива для вариантов анализа «Сыворотка», «Моча», «Другой1»,
«Другой2», выберите

Параметры

Параметры калибровки

Калибраторы

. Обычно позиция 1

программируется для вариантов «Сыворотка», «Моча», «Другой1», «Другой2», а позиция 2 не
используется. Поместите пробу (деионизированная вода) в позицию 1 синего штатива.

Система проводит для пробы до четырех повторных измерений и определяет данные
реагент-бланка (значение OD реагент-бланка).

1 повтор

Значение OD.

2 повтора

Среднее из двух значений OD.

3 повтора

Среднее из двух ближайших значений OD.

4 повтора

Наибольшее и наименьшее значение OD отбрасываются, два оставшихся значения OD
усредняются.

PN B40293AA

3-4

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Далее описаны значение OD реагента в первой точке (первые данные) и значение OD
реагента в последней точке (вторые данные).

Значение OD реагента в первой точке (первые данные)

• Значение OD реагента в первой точке (РБ) = {значение OD, измеренное в первой точке} -

{деионизированный водный бланк (данные фотокалибровки)}.

• Если значение OD реагента в первой точке выпадает из диапазона OD, заданного в меню

Параметры > Специальные параметры теста > Предел OD реаг.

Перв., данные помечаются

флагом отклонения от нормы «y» (при выходе за верхнюю границу диапазона) или «u»
(при выходе за нижнюю границу диапазона).

Значение OD реагента в последней точке (вторые данные)

• Значение OD реагента в последней точке (РБ) = {значение OD, измеренное в последней

точке} - {значение деионизированного водного бланка (данные фотокалибровки)}.

• Если значение OD реагента в последней точке выпадает из диапазона OD, заданного в

меню

Параметры > Специальные параметры теста > Предел OD реаген. > Послед.

, данные

помечаются флагом отклонения от нормы «Y» (при выходе за верхнюю границу
диапазона) или «U» (при выходе за нижнюю границу диапазона).

3.1.2 Анализ по конечной точке

В этом разделе описан анализ по конечной точке.

1-точечный анализ

Это общий анализ по конечной точке, который определяет OD реакционной смеси на основе
величины OD, измеренной в определенной фотометрической позиции.

PN B40293AA

3-5

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

OD реакционной смеси = OD (в определенной позиции) - OD0 (в позиции 0)

Двухточечное измерение (измерение бланка пробы)

Предназначено для анализа по конечной точке, для которого требуется коррекция по бланку
пробы. Значения OD, полученные до ввода реагента 2, следует исключить как канал бланка.
Чтобы получить правильные данные без учета влияния мутности или цвета сыворотки,
значения OD канала бланка вычитаются из значений OD, измеренных после ввода реагента 2.

Значение OD в этом анализе определяется по формуле:

K2 = {R1. V/(R1.V + R2.V + S.V)}

K3 = {(R1.V + S.V) / (R1.V + R2.V + S.V)}

Значение OD реакции = (Px - K2 × P0) - (K3 × Pz - K2 × P0).

Результат этого вычисления берется в качестве значения ОD реакции.

R1.V:

Объем введенного реагента 1

R2.V:

Объем введенного реагента 2

S.V:

Вводимый объем пробы

P0:

Значение OD в первой точке

Pz:

Значение OD, полученное до ввода реагента 2

Px:

Значение OD, полученное после ввода реагента 2

PN B40293AA

3-6

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Конечный анализ (поправка по бланку пробы)

В анализе этого типа используются две кюветы — одна для цветной реакции, другая для
бланка пробы. Сначала измеряются значения OD для бланка пробы, при котором
учитываются характеристики сыворотки. Затем значение бланка пробы вычитается из
измеренного значения OD фактической пробы (значение OD для цветного теста).

Такой анализ по конечной точке (коррекция по бланку пробы) позволяет получить более
точные данные, чем в случае двухточечного измерения, даже когда имеются неустранимые
проблемы с качеством сыворотки (пунктирная линия на приведенном ниже рисунке).

Значение OD реакции = [Значение OD для цветного теста (OD

)] – [Значение OD для бланка

пробы (OD

)]

3.1.3 Кинетический анализ

Кинетический анализ

PN B40293AA

3-7

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Двойной кинетический анализ

При данном анализе определяется скорость изменения абсорбции (в минуту) путем расчета
среднего изменения абсорбции ($OD) между двумя фотометрическими точками с
использованием метода наименьших квадратов. Затем система определяет скорость
изменения OD исследуемого вещества, производя расчет по формуле.

3.1.4 Анализ по фиксированным точкам

В анализе по фиксированным точкам измеряется значение OD в двух определенных
фотометрических точках. Измерения в этих двух фотометрических точках выполняются
после начала реакции реагента с пробой.

Значение OD реакции = OD

- OD

3.1.5 Контроль качества

Для контроля точности прибора используются самые разные методы контроля качества.

В программном обеспечении анализатора предусмотрена оценка контроля качества по
одиночному правилу, множественным правилам и двойному графику. Метод одиночного
правила используется наиболее широко, метод множественных правил используется для
предотвращения уведомлений о несущественных ошибках, а двойной график используется
для упрощения классификации системных и случайных ошибок.

В этой главе описан контроль с помощью двойного графика и контроль на основе
нескольких правил.

Подробнее о межсуточном контроле см. в разделе

7.3.5 Проверка контроля качества

главы 7.

PN B40293AA

3-8

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Контроль с помощью двойного графика

Материалы КК с нормальными и аномальными ожидаемыми значениями оцениваются
совместно.

Если пробы контролей нормального и аномального уровней не выходят за контрольный
предел, и обе пробы ведут себя как контроль высокой концентрации, либо как контроль
низкой концентрации, следует проверить систему калибровки с целью выявления
системных ошибок.

Если аномальный контроль ведет себя как контроль низкой концентрации, можно ожидать
проблем, связанных с реагентом. Преимуществом метода контроля по двойному графику
является простота классификации системных и случайных ошибок.

Контроль на основе нескольких правил

При межсуточном контроле ошибка контроля проверяется путем изучения графика
контроля, однако возникают сложности с подтверждением многочисленных тестов в
режиме реального времени. Метод контроля на основе нескольких правил позволяет быстро
справляться с ошибками в режиме реального времени, поскольку он определяет выход из
диапазона на основе специальных флагов.

При использовании этого метода контроля необходимо готовить пробы контроля
нормального и аномального уровня.

PN B40293AA

3-9

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Подробности контроля на основе нескольких правил см. на приведенном ниже рисунке.

Пояснение к обозначениям контроля на основе множественных правил и
логических связей

• Обозначение 1

указывает, что последовательно пройдены пять уровней принятия

решения, приведенные в сопроводительной таблице на следующей странице, для
выявления какого-либо нарушения соответствующего правила, если одна порция
контроля нарушает установленный предел «СРЕД±2SD».

• 1

— уровень принятия решения для выявления нарушения установленного

контрольного предела «СРЕД±3SD» одной порцией данных контроля. Если предел для
контроля не нарушен, запрашивается следующий уровень принятия решения — 2

. Если

контрольный предел нарушен, делается заключение о том, что должный контроль
качества не достигнут.

• 2

— уровень критериев для принятия решения о том, превышают ли в одну сторону

установленный контрольный предел «СРЕД±2SD» две последовательные порции
контроля. Если контрольный предел не нарушен, запрашивается следующий уровень
принятия решения — R

. Если контрольный предел нарушен, делается заключение о

том, что должный контроль качества не достигнут.

СОВЕТ

Использованный выше термин «непрерывные» может означать следующее.

— Непрерывность в обоих направлениях для одного и того же контрольного

вещества.

— Непрерывность по высокой или низкой концентрации между контрольными

веществами.

PN B40293AA

3-10

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

• R

— уровень принятия решения, позволяющий определить, вышла ли одна из двух

непрерывных порций данных с высокой или низкой концентрацией за установленный
контрольный предел «СРЕД+2SD», а другая порция — за установленный предел «СРЕД -
2SD».
Другими словами, принимается решение о выходе двух непрерывных порций данных за
пределы 4СО в одном и том же диапазоне. Если данные не вышли за контрольный
предел, принимается решение о переходе на следующий уровень принятия решения —
4

. Если данные вышли за контрольный предел, делается заключение о том, что

должный контроль качества не достигнут.

• 4

— уровень принятия решения, позволяющий определить, вышли или нет четыре

непрерывных порций контрольных данных за установленный контрольный предел
«СРЕД+1 SD» или «СРЕД-1 SD». Если оба контрольных предела не нарушены,
запрашивается следующий необходимый уровень принятия решения Nx. Но если предел
нарушен, это означает, что должный контроль качества не достигнут.

• N

— уровень принятия решения, позволяющий определить, находятся ли N (7—10)

непрерывных порций контрольных данных выше или ниже среднего контрольного
значения. Если контроли не вышли за контрольный предел, должный контроль качества
достигнут. Если контроли вышли за контрольный предел, должный контроль качества
не достигнут. В правиле Nx для принятия решения используется не более 10 порций
предыдущих данных.

• При помощи тренда оценивается, возрастают или убывают 4—10 последовательных

результатов измерения одного и того же контрольного материала.

При возникновении ошибки, причиной которой является нарушение пределов одного из
7 контролей на основе нескольких правил, к контрольным данным добавляется флаг
аномальных данных. Флаги аномальных данных и их причины описаны ниже.

Контрольный предел

Символ

ошибки

Причина ошибки

Нарушено правило 1

Случайная ошибка

Нарушено правило 2

Систематическая ошибка

Нарушено правило R

Случайная ошибка

Нарушено правило 4

Систематическая ошибка

Нарушено правило Nx

Систематическая ошибка

Отклонение тренда от
нормы

Повышение или снижение в данных
непрерывного контроля качества

PN B40293AA

3-11

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Пример ошибок контроля на основе множественных правил

Рис. 3.1

Далее описаны возможные причины и проверяемые элементы для случайных и
систематических ошибок, показанных на рисунке вверху. Как устранять ошибки, см. далее.

1. 2

: Системная ошибка. Контроли высокой и низкой концентрации вышли за контрольный

предел «2 SD» в одну сторону. Устанавливается флаг ошибки «3Q».

2. R

: Случайная ошибка. Контроль высокой концентрации вышел за контрольный предел

«2 SD», а контроль низкой концентрации вышел за контрольный предел «-2 SD».
Устанавливается флаг ошибки «4Q».

3. 4

: Системная ошибка. Четыре непрерывных результата контроля качества вышли за

контрольный предел «1 SD» в одну сторону. Устанавливается флаг ошибки «5Q».

4. 2

: Системная ошибка. При контроле с высоким значением два непрерывных результата

нарушили в одну сторону установленные контрольные пределы, превысив уровень «2 SD»
или опустившись ниже уровня «-2 SD». Устанавливается флаг ошибки «3Q».

5. 1

: Случайная ошибка. Один результат находится выше предела «3 SD» или ниже предела

«-3 SD». Устанавливается флаг ошибки «2Q».

6. Nx: Системная ошибка. Десять непрерывных результатов находятся ниже среднего

значения. Устанавливается флаг ошибки «6Q».

PN B40293AA

3-12

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Случайные ошибки

• Ошибка точности ввода (пробы или реагента)

Низкая точность ввода шприцом (пробы, реагента) из-за нарушения целостности или
неправильной установки шприца, попадания воздуха в водопроводную систему,
загрязнения пробоотборника, израсходования реагента и т.д.

• Низкая точность фотометра

Старение лампы.

• Потеря свойств реагентом

Неправильное хранение или загрязнение реагента.

• Плохая проба для контроля качества

Ошибочная проба, другая партия, и т.д.

• Недостаточная очистка

Мешалка очищена неправильно или недостаточно.

• Плохое перемешивание

Неисправен блок смесителя, используется неправильная мешалка, неисправна карусель
для кювет.

Систематические ошибки

• Неправильная калибровка

Неправильное растворение калибраторов.

• Потерявший свойства реагент

Потеря свойств реагентом, другая партия и т.п.

• Температура

Неправильный контроль температуры.

PN B40293AA

3-13

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

3.1.6 Краткая сводка по типам калибровки

Данная система позволяет формировать не более 15 типов калибровочных кривых. Ниже описаны
6 основных типов калибровочных кривых.

АКАЛ AA

• Эта калибровочная кривая строится с помощью двух различных калибраторов.

Пересечение с осью Y находится выше или ниже нулевой линии, но не проходит через
ноль (реагент-бланк).

• Калибровочная кривая такого типа используется для анализа по фиксированной точке

при ограниченном диапазоне линейности.

АКАЛ AB

• Эта калибровочная кривая строится с помощью одного калибратора и реагент-бланка.

Она пересекается с осью Y в нулевой точке.

• Калибровочная кривая такого типа используется для анализа по конечной точке.

Примером теста, использующего калибровку такого типа, является тест на глюкозу.

Значение концентрации калибратора

PN B40293AA

3-14

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

АКАЛ 7AB

• Эта калибровочная кривая формируется с помощью не менее 2 и не более

7 калибраторов. Пересечение с осью Y проходит в точке 0.

• Калибровочная кривая такого типа используется для иммунотурбидиметрического

анализа. Примером теста, использующего калибровку такого типа, является тест на
C-реактивный белок.

MCAL MB

• Задайте коэффициент калибровки с помощью теоретического метода или с

использованием отслеживаемого референсного материала.

• Коэффициент MB, полученный на основе коэффициента экстинкции или из справочных

данных для анализов IFCC (Международная федерация по клинической химии), т. е.
производный коэффициент.

• Примером теста, использующего калибровку такого типа, является тест на

лактатдегидрогеназу.

PN B40293AA

3-15

Описание системы

3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

MCAL 7MB

• Эта калибровочная кривая формируется путем ввода значения OD и концентрации не

более 7 калибраторов.

• Калибровочная кривая такого типа используется для иммунотурбидиметрического

анализа с непрерывно-криволинейными характеристиками.

АКАЛ nAB (процедура коррекции по одной точке)

Сначала проанализируйте один из множества стандартных растворов от 2AB до 7AB.
Используя соотношение между значениями OD реакции этого стандартного раствора и
ранее измеренного стандартного раствора, скорректируйте значения OD реакции других
стандартных растворов, а затем создайте заново график калибровки.

При наличии стандартного раствора с нулевой концентрацией график калибровки можно
скорректировать с помощью двух точек: OD0 и другого значения OD.

PN B40293AA

3-16

Описание системы
3.1 Порядок анализа проб в анализаторе AU480

Пример 1:

онцентрация ни одного из нескольких стандартных растворов не равна 0.

• Для калибровок, определенных как 2AB—7AB, можно выполнить одноточечное

обновление калибровочной кривой. Для получения нового значения OD реакции
используется один калибратор. Отношение между ранее полученным значением OD и
текущим значением OD приводит к регулировке значения OD других калибраторов, и
рассчитывается новая калибровочная кривая.

1. Выполните одноточечную коррекцию.

2. Пересчитайте калибровочную кривую.

Пример 2: концентрация хотя бы одного стандартного раствора равна 0.

• Если коррекция выполняется по двум точкам — КОНЦ1 и другая (КОНЦ3), — выполните

следующий расчет.

1. Используйте текущие значения OD реакции КОНЦ1 и КОНЦ3 (OD1' и OD3').

2. Скорректируйте каждую точку следующим образом.

ODn: предыдущее значение OD ODn': значение OD после коррекции

содержание .. 2 3 4 5 ..