Название задачи Перевод с английского языка Сводный отчет Название задачи: Влияние «гипогликемических функциональных продуктов, содержащих шелковый пептид», на глюкозу плазмы 20 июля 2009 года Основной исследователь : Джей Хьон Ганг, Университет Инджи при Сеульском госпитале Содержание I. Введение. 2 1. Исходные данные. 2 2. Задачи. 4 3. Схема. 4 (1) План и область исследования. 4 4. Метод исследования. 6 (1) Надежность клинических испытаний (надежность схемы) 6 (2) Надежность выбора интервала приема. 6 4.1. Исходные сырьевые материалы и продукт, используемые в клиническом испытании. 7 (1) Формулы исследуемых сырьевых материалов и продукта. 7 (2) Бирки исследуемых сырьевых материалов и продукта. 7 (3) Хранение исследуемых сырьевых материалов и продукта. 7 4.2. Прием и прекращение приема сырьевых материалов. 7 (1) Подтверждение поставки и приема сырьевых материалов. 7 (2) Метод приема. 7 (3) Доставка исследуемого продукта (двойной слепой метод) 7 (4) Подтверждение приема. 8 4.3. Включение в число испытуемых. 8 (1) Критерий включения. 8 (2) Критерий исключения. 9 4.4. Управление испытуемыми. 9 (1) Контроль деталей клинических испытаний. 9 (2) График посещения испытуемых. 9 4.5. Измеряемые показатели и периоды контроля. 10 5. Исследование базовой информации и привычек питания. 11 (1) Исследование базовой информации. 11 (2) Исследование информации, связанной с привычками питания, образом питания и физической нагрузкой. 11 6. Методы антропометрической оценки и замера показателей жира в организме, связанных со строением тела. 11 (1) Измерение роста и веса. 11 (2) Окружность талии. 11 (3) Измерение количества жира в организме и мышечной массы (TANITA) 12 7. Метод биохимического анализа. 12 (1) Липидная концентрация сыворотки. 12 (2) Тестирование функции печени. 12 (3) Тестирование глюкозного метаболизма. 12 8. Статистический анализ. 13 II. Организм.. 14 1. Демографическая информация до лечения. 14 2. Исследование антропометрических данных и измерение показателей жира в организме, связанных со строением тела. 14 3. Соблюдение указаний. 16 4. Результаты, полученные от испытуемых с уровнем соблюдения предписаний по приему шелкового пептида более 90%.. 17 4-1. Результаты оценки антропометрических данных и измерения жира в организме. 17 4-2. Результаты замера глюкозы плазмы и связанного с ними показателя (тестирование глюкозного метаболизма и инсулина) 19 4-3. Результаты химического тестирования крови. 20 4-4. Результат тестирования липида сыворотки. 22 4-5. Результаты тестирования функции печени. 24 4-6. Результаты измерений давления крови ВР и пульса PR.. 25 III. Заключение. 26 Список использованной литературы.. 27 I. Введение 1. Исходные данные Сахарный диабет (diabetes mellitus ) – это хроническое метаболическое заболевание, сопровождающееся осложнениями на различные органы, такие, как почки, глаза, нервная и сердечно-сосудистая системы, сердце, цереброваскулярная система, вследствие хронического продолжения подъема концентрации глюкозы в плазме. Сахарный диабет можно классифицировать по группам на диабет I и II типов. Диабет I типа, который также называется «инсулинозависимым сахарным диабетом» (ИЗСД), является аутоиммунным или иодиопатическим по природе и возникает, когда имеется «абсолютный дефицит инсулина», приводящий к неспособности выделять инсулин из-за разрушения бета-клеток в поджелудочной железе. Диабет 2 типа, который также называется «инсулиннезависимым диабетическим мелитусом» (ИНСД), связан с «относительным дефицитом инсулина», когда глюкоза плазмы и метаболизм обычно находятся под контролем, если поставляется относительно большое количество инсулина, поскольку органы, которым инсулин нужен для работы, сопротивляются воздействию инсулина (инсулиновая невосприимчивость), хотя бета-клетки поджелудочной железы все еще функционируют, выделяя некоторое количество инсулина. Согласно статистическим данным ВОЗ (Всемирная организация здравоохранения) в 1994 году в мире насчитывалось приблизительно 110400000 больных сахарным диабетом, и к 2010 году ожидается увеличение их количества на 117% до 234920000 человек. Чтобы предотвратить сахарный диабет, необходимы различные программы действия для диабета типа I и II. Пока что неизвестен метод контроля факторов риска для диабета типа I, и нужны более фундаментальные исследования механизма развития сахарного диабета. Для диабета типа II наилучший результат лечения можно получить путем одновременного использования диеты и физических упражнений, но поскольку такие методы требуют дополнительных усилий и трудны к исполнению, ведется разработка различных продуктов, которые могут способствовать контролю глюкозы в плазме крови. Шелк, производимый тутовым шелкопрядом (Bombyx mori ) – это великолепный макропротеин, получаемый естественным путем, который состоит из фиброина (волоконного, т.е. фибро-подобного протеина) и серицина (каучукового протеина), который соединен с фиброином. Между прочим, шелковый фиброин состоит из аминокислот 18 типов, и их главными компонентами являются глицин и аланин. Эти две аминокислоты занимают около 75% среди всех компонент фиброина. Кроме того, ввиду невозможности синтеза клиническим путем в данное исследование включены около 6% всех эссенциальных (незаменимых) аминокислот, которые необходимо принимать извне. Существует множество исследований воздействия шелка и родственных ему веществ на контроль глюкозы в плазме. Исследование фактического действия лекарственных средств, которыми пользуются пациенты, больные сахарным диабетом, в Корее, показало, что 82,9% больных имели опыт использования порошка тутового шелкопряда для лечения сахарного диабета. Это говорит о том, что существует большой интерес к тутовому шелкопряду и продуктам на его основе. Многочисленные исследования показали эффект снижения глюкозы в плазме крови от листьев тутового дерева (источник пищи для тутового шелкопряда), а также от вытяжки тутового шелкопряда и порошка. Сообщается, что тутовый шелкопряд и продукты на его основе чрезвычайно действенны в части антиокисления и функций, связанных с иммунитетом, в частности, доказано, что фиброин улучшает функцию печени и замедляет рост холестерина. Кроме того, начинает проясняться эффективность серицина (каучукового протеина), который находится в соединении с фиброином. Известно, что серицин, как особый протеин, содержит более 30% сериновой аминокислоты, что выделяет его среди других натуральных протеинов. Исследования функции серицина активно ведутся в Японии. Результаты этих исследований показывают, что он способствует пищеварению и поглощению элементов металлов, в эксперименте на мышах с индуцированным ректальным раком, количество полипов в толстой кишке было подавлено до 62%. Крайне важной технологией исследования и лечения сахарного диабета является культивирование клеток поджелудочной железы, и в Японии на основе применения серицина вместо иммунной сыворотки, как питательной среды для культур, объявлено, что технология действенна для культивирования клеток поджелудочной железы. Быстрый экономический рост и индустриализация привели к тому, что люди предпочитают быстрое питание, которое меняет режим приема пищи и тем самым наносит вред здоровью. Более того, чрезмерное загрязнение и стресс увеличивают число заболеваний взрослых такими недугами, как сахарный диабет, гиперлипимия и гипертония, что в настоящее время представляет серьезную социальную проблему. С этой точки зрения ответом на требования времени является разработка новых источников продуктов для промышленного использования, не просто, как продукта поддержания жизни, но как лечебное дополнение, позволяющее преодолевать различные заболевания и последствия загрязнений среды. Настоящее исследование имеет целью изучить эффект контроля уровня глюкозы в плазме крови при выработке шелкового олигопептида после создания необходимых условий для гидролиза. Кроме того, ставится задача устранения каких-либо рисков, сопровождающих процесс снижения глюкозы в плазме в связи с приемом функциональной пищи, а ее воздействие должно быть объективно и научно обосновано, оценено и подтверждено с целью предоставления потребителям безопасных, научно исследованных, высококачественных продуктов. Таковы цели данного исследования. Мы хотим путем рациональной оценки этого клинического испытания удостоверить эффективность и безопасность состава, содержащего шелковый пептид, который является главным ингредиентом продукта. 2. Задачи 1) Задача состоит в подтверждении безопасности и эффективности функционального продукта питания, содержащего шелковый пептид, который является главным ингредиентом продукта, с позиции замедления роста уровня глюкозы в плазме и посредством выполнения соответствующей оценки в процессе данного клинического испытания. 2) Необходимо представить надлежащую дозу потребления и метод приема исходных сырьевых материалов «шелкового пептида Е5К6» и использовать их в качестве базовых данных для получения разрешения на применение функциональных продуктов здорового питания на основе исходных сырьевых материалов. 3. Схема (1) План и область исследования 60 взрослых (в возрасте от 20 до 65 лет) с уровнем глюкозы в плазме натощак от 100 до 140 мг/дл были разделены пополам и случайным образом разбиты на две группы: экспериментальную и контрольную, первой из которых давали вещество «шелковый пептид Е5К6», а второй - плацебо (имитатор) в течение 8 недель, на протяжении которых посредством биопоказателей велась оценка глюкозы в плазме и замерялся вес. Таким образом, исследование контрольной группы, принимавшей плацебо, проводилось, как двойное слепое испытание, носящее случайный характер. Следующие вопросы оценивались на основе запрашиваемой информации. 1) Запрос социологических характеристик: Сбор информации путем общего вопросника (1) возраст (2) род занятий родителей (3) образование (4) уровень доходов 2) Оценка состояния здоровья 3) Оценка физической активности 4) Исследование симптомов по перечню и неблагоприятных факторов Следующие показатели измерялись при помощи биопоказателей, связанных с весовым контролем и безопасностью 1) Показатели для оценки антропометрических данных (1) рост (2) вес (3) окружность талии 2) Показатели строения тела, относящиеся к жиру в организме (TANITA) (1) BMI (2) содержание жира в организме (кг) (3) процентное содержание жира (%) (4) WHR (5) мышечная масса 3) Биохимические показатели а. Концентрация липидной сыворотки (1) общее количество холестерина (2) триглицерид (3) LDL (липопротеид низкой плотности ) холестерин (4) HDL (high- density lipoprotein - липопротеид высокой плотности (ЛВП) ) холестерин (5) отношение LDL/HDL б. Испытание функции печени. (1) активность GOT [glutamicoxaloacetic transaminase] аспартат-аминотрансфераза и GPT [glutamic pyruvic transaminase] аланинаминотрансфераза (2) концентрация альбумина сыворотки (3) щелочная активность фосфатазы и т.д. в. Испытание метаболизма глюкозы. (1) уровень глюкозы в плазме натощак (2) уровень глюкозы в плазме через 2 часа после еды (3) концентрация HbA1c г. Испытания, связанные с инсулином (1) концентрация инсулина (2) концентрация С-пептида 4) Показатели, связанные с безопасностью а. Гематологические показатели (1) гемоглобин (2) мочевая кислота (3) белые кровяные клетки (WBC) и т.д. б. Исследование ренальной функции (1) BUN (blood urea nitrogen - остаточный азот мочевины [крови] ) (2) уровень креатина в. Анализ мочи г. Прочее: (1) кальций / фосфор (2) Na / K / Cl (3) давление крови, ЭКГ, ректальное исследование и др. Исследование режима питания и потребляемой пищи 1) Привычная диета: Образ питания и стиль жизни, количество принимаемой пищи, несбалансированность питания и т.д. 2) Исследование питательности пищи: Оценка ежедневной питательности пищи на основе метода регистрации потребления за 24 часа (3 суток) Познания в области питания – Сведения о потреблении продуктов, которые снижают содержание глюкозы в плазме, на основе формул замены продуктов, представленных Корейским институтом питания. 4. Метод исследования (1) Надежность клинических испытаний (надежность схемы) (1) Количество испытуемых Количество испытуемых, необходимых для данного клинического исследования, оценивалось на основе статистических данных и реальных условий. Необходимое число испытуемых было выбрано статистическим путем с использованием информации по стандартному ожиданию на отклик, степени отклонения, силе воздействия и степени эффективности продукта. В общем, подходящее количество испытуемых для статистической надежности предположительно оценено на уровне, как минимум, по 20 субъектов в экспериментальной и контрольной группе, но в данном исследовании в каждую группу было зачислено по 30 человек. Субъекты Контрольная группа Дополнительная группа Разделение группа, принимающая плацебо группа, принимающая продукт испытуемые взрослые старше 20 лет взрослые старше 20 лет Количество чел. в группе 30 30 Продолжительность испытания 8 недель 8 недель (2) Длительность клинических испытаний В одном из докладов утверждалось, что для определения HbA1c, показателя, оценивающего эффект понижения глюкозы в плазме, необходимо, как минимум, 8 недель, поэтому для данного исследования была запланирована длительность в 8 недель. (2) Надежность выбора интервала приема (1) Надежность выбора дозы Данный продукт следует принимать, как пищевую добавку в объеме 6 грамм в день. Шелковый пептид, главный ингредиент, предписан в эффективной дозе 6 грамм в сутки на основании сведений, указанных выше в литературе и исследованиях. Дозы других исходных сырьевых веществ определялись на основе оценки их токсичности, безопасности и органической функции. потребляемое количество (грамм в сутки) исходное вещество контрольная группа испытуемая группа доля в составе (%) потребляемое количество (г) доля в составе (%) потребляемое количество (г) порошковый агар 100 6 шелковый пептид 100 6 (2) Надежность выбора длительности приема (метода приема) Настоящий продукт является функциональным, который действует, понижая уровень глюкозы в плазме. Для повышения эффективности средства рекомендуется принимать его до еды. Исходя из оценки разумной достаточности, прописан прием капсул из 100% шелкового пептида за 30 минут до еды, 3 раза в день по 2 грамма. 4.1. Исходные сырьевые материалы и продукт, используемые в клиническом испытании. (1) Формулы исследуемых сырьевых материалов и продукта Поскольку испытание проводилось двойным слепым методом, в нем использовались непрозрачные капсулы так, что испытуемые в каждой группе, включая контрольную и экспериментальную, принимали продукт, не догадываясь о его содержимом. Капсулы имели размер 0 с наполнением 400 мг и давались испытуемым по 5 штук за один раз по три раза в день. (2) Бирки исследуемых сырьевых материалов и продукта Данный исходный сырьевой материал является водопоглощаемым порошком, который упакован в капсулы РТР с PVDC (поливинилиденхлоридом) и может длительное время храниться, оставаясь безопасным за счет блокирования извне доступа воздуха, воды и микробиологических загрязнений. Указание о методах и дозах приема нанесены на бирке, а группы имеют только два обозначения 1 и 2. (3) Хранение исследуемых сырьевых материалов и продукта Что касается гарантийной сохранности, срок хранения сырьевых исходных материалов и продукта составляет около 2 лет. Продукты хранились в холодном месте при комнатной температуре без попадания прямых солнечных лучей с соблюдением установленного срока хранения до 2 лет. 4.2. Прием и прекращение приема сырьевых материалов (1) Подтверждение поставки и приема сырьевых материалов (1) Длительность приема Испытуемые были разделены на контрольную и экспериментальную группы, которые принимали соответственно плацебо и испытуемые продукт в течение 8 недель. (2) Метод приема Продукт принимался за 30 минут до еды по 3 раза в день (3) Доставка исследуемого продукта (двойной слепой метод) Клиника по борьбе с ожирением Сеульского госпиталя Бэйк, медицинского учреждения, поставляющего сырье и продукт, доставляла продукт после оценки различных проблемных вопросов. Продукт не мог даваться испытуемым в день его получения. Сначала производилась диагностическая оценка и неподходящие пациенты уведомлялись об этом. Фактическое лечение началось через одну неделю после получения сырьевых материалов и продукта. Основание для выбора двойного слепого метода Двойной слепой метод означает, что эффективность исследуемого лекарства оценивается, когда пациенты и исследователи не знают, какой из медикаментов является плацебо (т.е. не содержит активных ингредиентов), а какой является реальным лекарством (содержащим активный ингредиент). Информация об этом известна только судье (третьей стороне). Такой метод исследования используется для получения объективной оценки. (4) Подтверждение приема Исследователь, который также является диетологом в лаборатории исследования питания, части Сеульского госпиталя Бэйк (испытательный клинический центр), проверял, приняли ли испытуемые исследуемый продукт и не возникло ли каких-либо проблем или неблагоприятных последствий, предоставлял испытуемым информацию о режиме питания и продукте, выполнял постоянный мониторинг путем телефонных звонков и консультаций через определенные интервалы (1 раз в неделю). (2) Завершение приема сырьевых материалов и прекращение слепого исследования Исследование продолжалось в течение 8 недель, испытуемые проверялись перед началом лечения, через 4 недели (промежуточный) и после 8 недель лечения по завершении последнего приема. Через день или два после даты последнего приема лекарства все испытуемые были вызваны в Клинику по борьбе с ожирением Сеульского госпиталя Бэйк (клинический испытательный центр). Они были осмотрены и обследованы при помощи оценки показателей состояния в соответствии с назначенным лечением, и тем самым был завершен период оценки состояния. Слепой метод был раскрыт по завершении лечения, когда было обнародовано, кто из испытуемых входил в какую группу (контрольную или экспериментальную). (3) Прекращение приема исследуемого продукта и критерий прерывания лечения Среди испытуемых не было никого, кто бы прекратил прием продукта или завершил испытание вследствие неблагоприятной реакции в период клинических испытаний. 4.3. Включение в число испытуемых (1) Критерий включения (1) Состояние здоровья: Пациенты без метаболических расстройств (например, болезнь щитовидной железы), исключая тех, кто имеет нарушения толерантности к глюкозе и отклонены по другим медицинским показателям. (2) Возраст: Мужчины и женщины в возрасте старше 20 лет (3) Лицо, которое дало письменное согласие на участие в клиническом испытании после получения информации о его деталях. (2) Критерий исключения (1) лицо в возрасте до 18 и старше 65 лет (2) беременные женщины (3) пациент, который лечился от гипогликемии в последние 3 месяца (4) пациент с отклонениями в функции щитовидной железы (5) пациент с функциональными желудочно-кишечными расстройствами (6) пациенты, проходящие постоянное лечение по поводу других заболеваний (7) лица, постоянно употребляющие алкоголь не реже 4 раз в неделю (8) беременные или кормящие матери (9) лица, принимающие другие типы продуктов, которые обладают гипогликемическим эффектом, в течение 3 месяцев после начала испытания (10) имевшие хирургические вмешательства в последние 6 месяцев 4.4. Управление испытуемыми (1) Контроль деталей клинических испытаний Все заинтересованные стороны, вовлеченные в проведение этих клинических испытаний (спонсор, испытуемые, CRA (ассистент исследователя ) и диетолог, главный исследователь и исследователи, глава клинического испытательного центра, IRB (Independent Review Board – независимый наблюдательный орган )) подписались и согласились с процедурами этого клинического испытания. (2) График посещения испытуемых (1) Первоначальный визит (до приема продукта) Каждый, кто дал согласие на участие в этом испытании через Интернет или через клинический испытательный центр и кто удовлетворял критерию включения в число испытуемых по 1-му фильтрующему документу, подвергался проверке и обследованию состояния, чтобы быть окончательно отобранным в качестве испытуемого, после чего заполнял форму добровольного согласия. Если форма добровольного согласия не вызывала проблем и если человек удовлетворял таким критериям, как измеряемые показатели состояния и анализ крови, он или она отбирались в качестве испытуемого и уведомлялись в индивидуальном порядке о начале приема продукта в определенное время. (2) Промежуточный визит (через 4 недели после начала приема лекарства) Пациенты, уведомленные о приеме продукта, начали лечение в определенный момент. Лечение продолжалось, если не возникало осложнений, вызванных им, и если не было какой-либо неблагоприятной реакции, после чего пациент наносил промежуточный визит в клинический центр через 4 недели после начала лечения. В это время производилась оценка показателей, связанных с оценкой состояния, вызванного лечением, поскольку это был период середины проведения клинического испытания. (3) Заключительный визит (через 8 недель после начала приема лекарства) Если в результате приема продукта не возникало побочных проблем или какой-либо неблагоприятной реакции, то лечение продолжалось. После нанесения промежуточного визита через 4 недели в соответствии с графиком испытания, испытуемые посещали центр через 8 недель после начала лечения, и это было конечной точкой лечения. В это время производилась оценка эффективности лечения за весь период испытания в соответствии с критерием оценки состояния. 4.5. Измеряемые показатели и периоды контроля область исследования измеряемый показатель до приема через 4 недели через 8 недель контакты с испытуемыми телефонные звонки и уведомление о графике (еженедельно) = = = исследование базовой информации об испытуемых (Приложение 1) вопросник, включающий демографические и социологические характеристики = анкета об оценке состояния здоровья = исследование физической активности = исследование уровня физической активности и режима питания (Приложение 1) исследование анкеты по вопросам образа питания = Потребление питательных веществ (Приложение 2) состояние ежедневного приема пищи (24-часовой метод регистрации) = = показатели оценки антропометрических измерений рост, вес, окружность талии = = = замер показателей организма, связанных с наличием жиров (TANITA) BMI (body mass index - индекс массы тела ), жир в организме, процентная доля жира, WHR (отношение окружностей талии и бедра), мышечная масса = = = липидная концентрация сыворотки общее содержание холестерина, концентрация триглицеридов, концентрация LDL холестерина, концентрация HDL холестерина, отношение LDL/ HDL = = = тестирование функции печени активность GOT аспартат-аминотрансфераза и GPT аланинаминотрансфераза, альбумин, щелочная фосфотаза = = = тестирование глюкозного метаболизма глюкоза плазмы, HbA1c, РР2 = = = кровяное давление и пульс PR = = = ЭКГ = = = Гематологический показатель Гемоглобин, мочевая кислота = = = Тестирование ренальной функции BUN – остаточный азот мочевины, уровни креатинина = = = Анализ мочи = = = другие показатели, связанные с безопасностью Кальций/Фосфор, Na/K/Cl = = = 5. Исследование базовой информации и привычек питания (1) Исследование базовой информации Индивидуальная склонность и предрасположенность к ожирению, которые могут повлиять на ожирение, были идентифицированы посредством оценки общей информации об испытуемом (например, истории болезни, биографии, текущего образа жизни и уровня физической активности) через анкету (форма медицинского обследования для получения базовой информации для исследований), розданную во время начала программы. (2) Исследование информации, связанной с привычками питания, образом питания и физической нагрузкой Чтобы выяснить образ питания испытуемого, каждый пациент должен был вести журнал о своем питании на основе 24-часовой регистрационной формы питания (Приложение 2) за 3 дня до первого визита и за три дня после последнего визита. С целью обеспечения точности ведения журнала все пациенты были обучены вычислять питательность продуктов на глаз и заносить эти цифры в журнал. Для анализа питательности потребленной за 24 часа пищи из журналов, составленных до начала программы (неделя 0) и исследовательских материалов через 4 и 8 недель лечения, были выбраны 2 дня рабочей недели и 1 день выходных. Журнал регистрации питательности потребляемой ежедневно пищи за 24 часа был проанализирован при помощи программы анализа питательности can - pro (информационный Центр питательности продуктов, аффилированный Корейскому обществу питания) и питательность потребляемой за день пищи была представлена расчетом за три дня. 6. Методы антропометрической оценки и замера показателей жира в организме, связанных со строением тела (1) Измерение роста и веса Рост и вес являются важными показателями измерения индекса массы тела BMI и, следовательно, очень важны, как базовые показатели определения тучности. (2) Окружность талии Окружность талии – это полезный показатель, который отражает брюшной жир. Он отражает риски развития болезни лучше, чем BMI. В частности известно, что даже если BMI ниже 25 кг/кв.м, при большой окружности талии риски развития сахарного диабета 2 типа, гиперлипидемии, гипертонии и заболеваний коронарной артерии возрастают. Основываясь на результатах исследования, проведенного в Европейском Союзе (ЕС), ВОЗ (Всемирная организация здравоохранения) утверждает, что диагностический критерий брюшного ожирения для женщин равен 88 дюймам. Однако, поскольку результаты корейских исследований предполагают, что корейцы сравнительно меньше, чем люди западного полушария, то диагностический критерий брюшного ожирения для корейских женщин равен 80 дюймам. (3) Измерение количества жира в организме и мышечной массы (TANITA) Чтобы измерить содержание жира в организме, массу свободного жира и мышечную массу более точно, использовался метод Tanita. 7. Метод биохимического анализа (1) Липидная концентрация сыворотки После выделения сыворотки вслед за образцом крови на пустой желудок, концентрации общего холестерина, HDL-холестерина, триглицеридов и свободной жирной кислоты были проанализированы с использованием промышленного комплекта инструментов и биохимического авто анализатора. Концентрация LDL-холестерина была рассчитана по формуле Френдвальда (1972): [LDL холестерин = общий холестерин – (HDL холестерин + триглицериды/5)]. (2) Тестирование функции печени GOT - аспартат-аминотрансфераза и GPT - аланинаминотрансфераза , протеин, альбумин, щелочная фосфатаза и т.д. (3) Тестирование глюкозного метаболизма Для испытания клинического действия были измерены все био-показатели, связанные с глюкозой плазмы, то есть, уровень глюкозы в плазме натощак, уровень глюкозы в плазме после приема пищи и HbA1c ( glycosylated hemoglobin (= Ghb) -гликозилированный гемоглобин ). Однако для биопоказателей, связанных с инсулином, можно было измерить только концентрацию инсулина глюкозы плазмы и С-пептида. (1) Глюкоза плазмы натощак Показывает уровень глюкозы в плазме, измеренный с венозной кровью после, как минимум, 12 часов голодания при использовании единиц mmol/L (миллимоль на литр) или мг/дл. Этот метод применим ко всем экспериментам, как на животных, так и для человека. (2) Уровень глюкозы после приема пищи Чтобы измерить уровень глюкозы после приема пищи, был выполнен стандартный оральный тест толерантности к глюкозе (OGTT) на 75 г глюкозы. Строго говоря, он отражает уровень глюкозы в плазме, который появляется в результате OGTT через 120 минут, и может быть также отмечен, как 2-часовая глюкоза (глюкоза в плазме через 2 часа после приема пищи). Однако, во время использования функциональной пищи в целях клинического испытания, эту величину можно зафиксировать, как уровень глюкозы в плазме для 75 грамм глюкозы через 2 часа, и судя по всему, метод можно применять также к животным. (3) HbA1 c (глюкатный гемоглобин) HbA1c – часть гемоглобина в эритроцитах, постепенно соединяется с глюкозой, как не-энзимы, в период существования глобулов, а затем превращается в сахар. Следовательно, по уровню сахаризации HbA1c можно оценить концентрацию глюкозы в плазме, которая представляет собой период существования глобулов. По этой причине HbA1c широко используется, как самый основной показатель для контроля глюкозы в плазме, и концентрация глюкозы в плазме может быть определена по значению HbA1c (величина глюкатного гемоглобина) за последние несколько недель. Измерение HbA1c, полученное при объединении долгосрочных изменений глюкозы в плазме, становится хорошим руководством, и можно получить данные по одному образцу крови. Однако для сравнения величины HbA1c требуется экспериментальный период продолжительностью не менее 8 недель. Помимо этого существует метод HPLC ([high-pressure liquid chromatography] жидкостная хроматография высокого давления ), метод электрофореза, метод столба борной кислоты, ТВА метод и метод иммунологического анализа, но для измерений обычно используется автоматическое оборудование (например, DCA 2000, Гетеборг, Швеция). Строго говоря, величина HbA1c – это показатель, который отражает результаты измерений, полученных методом HPLC; результаты, полученные на установке DCA 2000, помечаются, как величина HbA1c (глюкатный гемоглобин). Поскольку такое оборудование относительно дорогое, рекомендуется поручить измерение лаборатории клинической патологии в госпитале. Величины HbA1c обозначаются в процентах, и в качестве стандартов рекомендуется использовать DCCT (группа наблюдения диабета, проведения анализов и исследования диабета и его осложнений, 1993) и UKPDS (Перспективные исследования диабета в Великобритании, 1998). (4) Биопоказатели, связанные с безопасностью клинических испытаний Производится определение BUN (blood urea nitrogen - остаточный азот мочевины [крови] ), креатина, мочевой кислоты с целью оценки ренальной функции. Измерение кальция, фосфора, а также Na/K/Cl производится для оценки общего состояния питательности. 8. Статистический анализ Статистический анализ этого испытания проводился в лаборатории по клиническим испытаниям питательности при Университете Инджи Сеульского госпиталя Бэйк. Полученные в этом испытании данные обрабатываются при помощи статистической программы SPSS, а значимое расхождение средних величин между контрольной и экспериментальной группами, а также значимость средних величин, полученных до и после эксперимента в каждой группе, оценивается по величине p<0,05. Значимость результата сравнения между группами было подтверждено Т-тестированием независимых образцов для непрерывных переменных и при помощи теста Хи-квадрат для категоричных переменных, тогда как для сравнения каждой группы до и после испытания использовалось парное Т-тестирование. Кроме того, для сравнения результатов между группами с целью определения различий был выполнен анализ ANCOVA с корректированным ковариантным эффектом. II. Организм 1. Демографическая информация до лечения Демографические характеристики, которые анализировались посредством предварительного анкетирования, представлены ниже (Таблица 1). Там нет значимого различия по всем пунктам между экспериментальной и контрольной группами. Испытуемые, которые участвовали в испытании, имели возраст от 20 до 65 лет, а средний возраст обоих групп был аналогичным: 51,7 +/- 1,28 в экспериментальной группе и 51,03+/- 1,59 в контрольной группе. Для эксперимента были собраны взрослые, имеющие уровни глюкозы в плазме натощак от 100 до 140. Таблица 1. Общая характеристика испытуемых. пункт анкеты экспериментальная группа (n = 30) контрольная группа*) (n = 30) возраст Средний ± SEM 51,7±1,28 51,03±1,59 уровень образования начальная школа, % - - средняя школа, % 19,4 6,35 высшее образование, % 41,9 25,8 университет, % 35,5 58,1 магистратура, % 3,2 9,7 среднемесячный доход более 1000,000 корейских вон % 9,7 16,1 более 1000,000- но менее, чем 2000,000 вон % 35,5 32,3 более 2000,000- но менее, чем 3000,000 вон % 22,6 16,1 более 3000,000- но менее, чем 4000,000 вон % 12,9 12,9 более 4000,000- но менее, чем 5000,000 вон % 12,9 12,9 более 5000,000- но менее, чем 6000,000 вон % - 6,5 более 6000,000- но менее, чем 7000,000 вон % 3,2 - более 7000,000 вон % 3,2 3,2 семейная история заболевания DM да, % 48,4 41,9 нет, % 51,6 58,1 *) Незначимо согласно тесту Хи-квадрат от величины для группы, принимавшей плацебо. 2. Исследование антропометрических данных и измерение показателей жира в организме, связанных со строением тела Результаты диагностического анализа ITT антропометрических изменений у 60 испытуемых (30 испытуемых в контрольной группе и 30 испытуемых в экспериментальной группе), которые совершили заключительный визит через 8 недель, представлены ниже (Таблица 2). Если взглянуть на изменения веса в контрольной и экспериментальной группах через 8 недель, то экспериментальная группа показала уменьшение на 0,02 кг, тогда как контрольная группа показала снижение на 0,42 кг (р=0,912, р=0,234 соответственно). При сравнении между группами большее снижение выявлено у контрольной группы, хотя статистически значимого различия не наблюдалось (р=0,338). Анализ результатов изменения BMI через 8 недель показывает, что BMI уменьшился в обоих группах на 0,02 кг/§3 в экспериментальной группе и на 0,15 кг/§3 в контрольной группе, но статистически значимого различия не наблюдалось (р=0,824, р=0,255 соответственно). При сравнении между группами также большее снижение обнаружено у контрольной группы, чем у экспериментальной, но статистически значимого различия не наблюдалось (р=0,390). С точки зрения изменений в Tanita/ЖИР (кг) через 8 недель наблюдался прирост на +0,17 кг в экспериментальной группе и снижение -0,56 кг в контрольной группе (р=0,576, и 0,127 соответственно), но статистически значимого различия не наблюдалось. Кроме того, отсутствовало статистически значимое различие при сравнении между группами (р=0,122). Результаты изменений внутри групп и сравнения между группами величин Tanita/ЖИР (кг) и свободной массы жира (FFM, кг) через 8 недель также не показали каких-либо значимых различий. Изменения окружности талии через 8 недель показывают, что отмечено уменьшение -1,59 см в экспериментальной группе и уменьшение -1,3 см в контрольной группе, что указывает на статистически значимые уменьшения через 8 недель в обоих группах (р=0,002, р=0,034 соответственно). Однако, при сравнении между группами статистически значимого различия не наблюдалось (р=0,072). Кроме того, результаты анализа ANCOVA (анализ ковариации случайных величин) всех переменных выявил, что физические переменные со статистически значимым различием отсутствуют. Таблица 2. Изменения антропометрических переменных weight (kg) weight (kg) weight (kg) BMI (kg/㎡) BMI (kg/㎡) BMI (kg/㎡) Fat (kg) Fat (kg) Fat (kg) Fat (%) Fat (%) Fat (%) FFM (kg) FFM (kg) FFM (kg) Waist (cm) Waist (cm) Waist (cm) величина экспериментальная группа (n = 30) контрольная группа (n = 30) p- величина 2) p- величина 3) вес ( кг ) 0 неделя 68,051) ± 1,87 67,35 ± 2,24 4 неделя 67,93 ± 1,91 67,14 ± 2,26 8 неделя 68,03 ± 1,89 66,94 ± 2,22 8 неделя - 0 неделя -0,02 ± 0,22 -0,42 ± 0,34 0,338 0,335 p-величина4) 0,912 0,234 BMI ( кг / кв.м ) 0 неделя 25,43 ± 0,50 24,63 ± 0,57 4 неделя 25,38 ± 0,51 24,54 ± 0,59 8 неделя 25,41 ± 0,49 24,48 ± 0,58 8 неделя - 0 неделя -0,02 ± 0,08 -0,15 ± 0,13 0,390 0,342 p-величина 0,824 0,255 Жир ( кг ) 0 неделя 20,19 ± 1,03 20,09 ± 1,11 4 неделя 20,11 ± 1,05 19,50 ± 1,05 8 неделя 20,36 ± 1,05 19,89 ± 1,05 8 неделя - 0 неделя 0,17 ± 0,30 -0,56 ± 0,35 0,122 0,116 0,576 0,127 Жир (%) 0 неделя 29,99 ± 1,50 29,80 ± 1,27 4 неделя 29,92 ± 1,51 29,04 ± 1,23 8 неделя 30,21 ± 1,54 29,14 ± 1,32 8 неделя - 0 неделя 0,23 ± 0,34 -0,66 ± 0,47 0,136 0,122 p-величина 0,513 0,175 FFM (масса свободного жира) ( кг ) 0 неделя 47,80 ± 1,87 47,27 ± 1,76 4 неделя 47,78 ± 1,90 47,64 ± 1,78 8 неделя 47,74 ± 1,91 47,42 ± 1,80 8 неделя - 0 неделя -0,06 ± 0,17 0,15 ± 0,35 0,582 0,637 0,700 0,671 Талия ( см ) 0 неделя 86,30 ± 1,32 83,73 ± 1,66 4 неделя 84,32 ± 1,26 83,12 ± 1,74 8 неделя 84,71 ± 1,28 82,43 ± 1,63 8 неделя - 0 неделя -1,59 ± 0,46 -1,30 ± 0,58 0,702 0,924 p-величина 0,002* 0,034* 1) Среднее +/- S.E. 2) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при независимом Т-тестировании (*р<0,001) 3) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при анализе ANCOVA (регулирование базовой линии, как ковариантной переменной) 4) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при парном Т-тестировании 3. Соблюдение предписаний Уровень соблюдения предписаний по приему исследуемого продукта 60 испытуемыми, которые завершили клиническое испытание, рассчитывалось по следующей формуле. Соблюдение предписаний по приему продукта = (предписанное количество – возвращенное количество) / количество пищи, необходимое для потребления Уровень соблюдения предписаний (УСП) по приему продукта через 4 и 8 недель был высоким, зарегистрированным на уровне 80% для всех испытуемых. Значительного различия между УСП к продукту у испытуемых из экспериментальной и контрольной групп не было. Средняя величина УСП продукта составила 88,1%. Таблица 3. Уровень соблюдения предписаний по приему продукта (следование указаниям по приему) экспериментальная группа контрольная группа p-величина УСП на 4 неделе (6%) 88,3 87,1 0,719 УСП на 8 неделе (%) 90,5 86,5 0,149 средняя величина УСП (%) 89,3 86,8 0,351 общая величина УСП (%) 88,1 4. Результаты, полученные от испытуемых с уровнем соблюдения предписаний по приему шелкового пептида более 90% Чтобы выяснить влияние шелкового пептида на глюкозу плазмы в соответствии со средней УСП за 8 недель, были проанализированы изменения измеряемых переменных по испытуемым с УСП более 90%. Количество испытуемых для анализа, которые имели УСП 90%, равнялось 30: 15 в экспериментальной группе и 15 в контрольной группе. 4-1. Результаты оценки антропометрических данных и измерения жира в организме Результаты изменений антропометрических данных представлены ниже (Таблица 4). Изменения антропометрических переменных, таких как вес, жир (%), жир (кг) и окружность талии, через 8 недель не показали значительных снижений ни в контрольной, ни в экспериментальной группах, и какого-либо значимого расхождения антропометрических данных при сравнении различных групп выявлено не было. Таблица 4. Изменения антропометрических переменных. weight (kg) weight (kg) weight (kg) BMI (kg/㎡) BMI (kg/㎡) BMI (kg/㎡) Fat (kg) Fat (kg) Fat (kg) Fat (%) Fat (%) Fat (%) FFM (kg) FFM (kg) FFM (kg) Waist (cm) Waist (cm) Waist (cm) показатель экспериментальная группа (n = 15) контрольная группа (n = 15) p- величина 1) p- величина 2) вес ( кг ) 0 неделя 69,40 ± 2,561) 68,67 ± 3,20 4 неделя 69,28 ± 2,61 68,35 ± 3,25 8 неделя 69,40 ± 2,51 68,48 ± 3,18 8 неделя - 0 неделя 0,00 ± 2,53 -0,19 ± 0,52 0,749 0,737 p- величина3) 1,000 0,723 BMI ( кг / кв.м ) 0 неделя 25,34 ± 0,71 24,77 ± 0,79 4 неделя 25,30 ± 0,75 24,66 ± 0,82 8 неделя 25,34 ± 0,67 24,71 ± 0,80 8 неделя - 0 неделя -0,01 ± 0,09 -0,06 ± 0,19 0,797 0,653 p- величина 0,955 0,754 Жир ( кг ) 0 неделя 20,64 ± 1,52 20,47 ± 1,48 4 неделя 20,44 ± 1,57 19,49 ± 1,37 8 неделя 20,80 ± 153 19,47 ± 1,26 8 неделя - 0 неделя 0,16 ± 0,51 -1,01 ± 0,63 0,165 0,137 0,755 0,125 Жир (%) 0 неделя 29,84 ± 2,21 29,82 ± 1,56 4 неделя 29,55 ± 2,21 28,53 ± 1,44 8 неделя 29,99 ± 2,25 28,59 ± 1,48 8 неделя - 0 неделя 0,15 ± 0,55 -1,23 ± 0,79 0,167 0,171 p-величина 0,789 0,132 FFM (масса свободного жира) ( кг ) 0 неделя 49,22 ± 2,67 48,21 ± 2,47 4 неделя 49,39 ± 2,71 48,87 ± 2,48 8 неделя 49,33 ± 2,74 49,02 ± 2,59 8 неделя - 0 неделя 0,11 ± 0,21 0,81 ± 0,54 0,235 0,232 0,613 0,152 Талия ( см ) 0 неделя 87,71 ± 1,71 85,02 ± 2,29 4 неделя 84,94 ± 1,69 83,51 ± 2,55 8 неделя 86,23 ± 1,62 83,59 ± 2,49 8 неделя - 0 неделя -1,49 ± 0,74 -1,43 ± 0,87 0,959 0,966 p-величина 0,066 0,125 1) Среднее +/- S.E. 2) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при независимом Т-тестировании (* р<0,05, **р<0,001) 3) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при анализе ANCOVA (регулирование базовой линии, как ковариантной переменной) 4) значимое различие между 0 неделей и через 8 недель при парном Т-тестировании 4-2. Результаты замера глюкозы плазмы и связанного с ними показателя (тестирование глюкозного метаболизма и инсулина) В отношении изменения глюкозы плазмы натощак экспериментальная группа показала значительное снижение – 11,07 мг/дл за 8 недель (р=0,004), тогда как контрольная группа дала снижение лишь на -2,0 мг/дл, но при незначительной разнице (р=0,512). При сравнении между группами значительное уменьшение глюкозы плазмы наблюдалось в экспериментальной группе по сравнению с контрольной группой (р=0,048). Концентрация глюкозы в плазме через 2 часа после еды по результатам 8 недель показала тенденцию большего снижения в экспериментальной группе, чем в контрольной, но статистически значимой разницы обнаружено не было. Кроме того, по результатам 8 недель в экспериментальной группе тенденцию к снижению показала величина HbA1c, тогда как в контрольной группе она выросла. Статистически значимой разницы не было. Таблица 5. Изменения уровня глюкозы, РР2 и HbA 1 c FBS (mg/dl) FBS (mg/dl)       показатель экспериментальная группа (n = 15) контрольная группа (n = 15) p- величина 1) p- величина 2) FBS (сахар крови натощак) ( мг/дл) 0 неделя 118,27 ± 3,351) 118,27 ± 2,52 4 неделя 107,73 ± 4,47 111,53 ± 6,19 8 неделя 107,20 ±