Лекции по фармацевтической химии - часть 13

Макролиды 

 

 

97

Оптическая активность. Макролиды являются оптически актив-

ными соединениями и вращают плоскость поляризации света влево. Ве-
личины удельного вращения данных веществ приведены в табл. 5. 

Таблица 5 

Величины удельного вращения макролидов 

Вещество 

Растворитель 

(концентрация, г/л) 

20

]

[

D

α

 

эритромицин 

безводный этанол (20) 

от -71

° до -78° 

кларитромицин 

хлороформ (10) 

от -89

° до -95° 

рокситромицин 

ацетон (10) 

от -93

° до -96° 

азитромицин 

безводный этанол (20) 

от -45

° до -49° 

 
Разные  эритромицины,  несмотря  на  незначительное  различие  в 

химической  структуре,  имеют  неодинаковые  величины  удельного  вра-
щения.  Например,  для  эритромицина  А  его  величина  составляет  -
72,3

±2,1°, а для эритромицина С – -66,7±2,8°. 

 

3.3. Химические свойства 

 
Химические  свойства  эритромицина  и  его  производных  обуслов-

лены третичной аминогруппой в остатке дезозамина (основные свойст-
ва); гидроксильными групппами в агликоне и углеводных остатках (об-
разование сложных эфиров, кеталей и полукеталей, реакции дегидрата-
ции);  карбонильной  группой  (образование  полукеталей  и  кеталей)  и 
лактонной группой (гидролиз). 

Макролиды обладают достаточно выраженными основными свой-

ствами. Например, величина pK

BH

+ эритромицина равна 8,9; рокситро-

мицина – 9,17. Эритромицин и другие макролиды образуют соли с анио-
нами  различных  кислот,  взаимодействуют  с  анионными  реагентами 
(общеалкалоидными  реактивами,  тетрафенилборатом  натрия,  анионны-
ми красителями и т.д.). Реакции с анионными реагентами, приводящие к 
образованию  малорастворимых  соединений,  используются  для  иденти-
фикации  эритромицина  и  других  антибиотиков  данной  группы.  Так, 
тетрафенилборат эритромицина практически нерастворим в воде и име-
ет температуру плавления 183 – 186 

°С. Реакции с анионными органи-

ческими 

красителями 

используются 

при 

экстракционно-

фотометрическом  (сульфофталеины)  и  экстракционно-флуориметри-
ческом (галогенпроизводные флуоресцеина) определении макролидов. 

В  водных  растворах  в  кислой  и  щелочной  среде  макролиды  под-

вергаются различным химическим превращениям: гидролизу, образова-
нию полукеталей и кеталей, дегидратации и др.  

 А.К. Лекции по фармацевтической химии 

 

 

98

Например, эритромицин образует в кислой среде следующие про-

дукты: 

O

O

эритромицин енол эфир

CH

3

кладиноза-O

дезозамин-O

H

3

C

H

3

C

CH

3

H

3

C

O

OH

OH

CH

3

C

2

H

5

O

O

CH

3

кладиноза-O

дезозамин-O

H

3

C

H

3

C

CH

3

H

3

C

O

OH

CH

3

C

2

H

5

O

O

O

CH

3

кладиноза-O

дезозамин-O

H

3

C

H

3

C

CH

3

H

3

C

O

CH

3

C

2

H

5

O

ангидроэритромицин

эритролозамин

 

При  действии  на  эритромицин  концентрированных  кислот  обра-

зуются окрашенные продукты. Например, при взаимодействии данного 
антибиотикас  концентрированной  серной  кислотой  появляется  красно-
вато-коричневое  окрашивание,  с  хлороводородной  кислотой - жёлтое. 
Добавление  концентрированной  хлороводородной  кислоты  к  ацетоно-
вому  раствору  эритромицина  приводит  к  появлению  оранжевого  окра-
шивания,  переходящего  в  красное,  а  затем  в  интенсивно  фиолетово-
красное.  Данные  реагенты  используют  для  идентификации  эритроми-
цина. 

Одним из продуктов превращения эритромицина в щелочной сре-

де является псевдоэритромицин (полукеталь и простой эфир енола): 

HO

O

псевдоэритромицин А 

полукеталь

CH

3

кладиноза-O

дезозамин-O

H

3

C

H

3

C

CH

3

H

3

C

O

OH

CH

3

C

2

H

5

OH

O

псевдоэритромицин А 

эфир енола

HO

O

CH

3

кладиноза-O

дезозамин-O

H

3

C

H

3

C

CH

3

H

3

C

O

OH

CH

3

C

2

H

5

O

 

Макролиды 

 

 

99

4. Контроль качества 

 

4.1. Идентификация 
 

Для  идентификации  эритромицина  используют  ИК-спектро-

скопию,  ТСХ  и  химические  реакции  (например,  с HCl, ксантгидролом 
или H

2

SO

4

).  

Идентификацию эритромицина методом ТСХ проводят на силика-

геле. Подвижная фаза представляет собой смесь неполярного раствори-
теля (толуола, этилацетата) с полярным растворителем. Для получения 
основания  эритромицина  в  подвижную  фазу  добавляют  концентриро-
ванный  раствор  аммиака  либо  аммиачный  буфер.  Например,  согласно 
Ph. Eur. 4 в  качестве  подвижной  фазы  используется  смесь (4:8:9) 2-
пропанола, 150 г/л раствора ацетата аммония, доведенного до рН 9 ам-
миаком, и этилацетата. Проявление хроматограмм проводят с помощью 
реактива,  содержащего 4-метоксибензальдегид  (анисовый  альдегид), 
этанол и серную кислоту. 

Для идентификации полусинтетических макролидов, как правило, 

применяют ИК-спектроскопию и ВЭЖХ. 

 
4.2. Испытания на чистоту 
 

При контроле чистоты субстанций эритромицина и других макро-

лидов  определяют  прозрачность  и  цветность  растворов,  удельное  вра-
щение,  примеси  родственных  соединений,  содержание  воды  (табл. 6), 
сульфатной золы и др. Поскольку макролидные антибиотики обладают 
незначительной растворимостью в воде, рН их растворов обычно не оп-
ределяют (в Ph. Eur. 4 данный показатель регламентируется только для 
азитромицина – pH раствора, полученного при растворении 0,100 г ан-
тибиотика  в 25 мл  метанола  и  последующем  разбавлении  водой  до 50 
мл, равен 9,0 – 11,0). 

Таблица 6 

Содержание воды и действующего вещества  

в субстанциях макролидов (согласно Ph.Eur. 4) 

Вещество 

H

2

O (%) 

Основное вещество*, % 

эритромицин 

до 6,5 

суммарное содержание эритромици-

нов А, B, C -  93,0 – 102,0%; эритро-

мицины A и B - максимум по 5,0% 

кларитромицин 

до 2,0 

96,0 – 102,0 

рокситромицин 

до 3,0 

96,0 – 102,0 

азитромицин 

1,8 – 6,5 

94,0 – 102,0 

Примечание: *-в расчёте на безводное вещество 

 А.К. Лекции по фармацевтической химии 

 

 

100

Определение  примесей  родственных  соединений  в  субстанциях 

макролидов проводят методом ВЭЖХ (обычно при таких же условиях, 
что  и  количественное  определение).  В  качестве  таких  примесей  могут 
выступать близкие по структуре антибиотики (например, для эритроми-
цина это различные эритромицины, кроме A, B и C), а также продукты 
разрушения (псевоэритромицин, ангидропроизводные и т.д.). 

 

4.3. Количественное определение 
 

Количественное  определение  макролидов  проводят,  главным  об-

разом, методом ВЭЖХ (табл. 7). 

Эритромицин, как было отмечено выше, представляет собой смесь 

нескольких  антибиотиков.  Для  их  разделения  в  качестве  неподвижной 
фазы используют сополимер стирола и дивинилбензола. Подвижной фа-
зой  является  смесь  фосфатного  буферного  раствора  (рН 9), трет-
бутилового  спирта  и  ацетонитрила.  Хроматографирование  проводится 
при  температуре 70 

°С.  Условия  ВЭЖХ-анализа  эритромицина  обу-

словлены  следующими  причинами:  в  сильнокислой  среде  эритромици-
ны  быстро  разрушаются;  при  использовании  химически  модифициро-
ванных  силикагелей  и  слабокислых  или  нейтральных  подвижных  фаз 
невозможно добиться приемлемого разделения различных эритромици-
нов.  В  щелочной  среде  происходит  разрушение  химически  модифици-
рованных  силикагелей.  Повышенная  температура  необходима  для 
уменьшения нахождения времени эритромицинов в колонке.  

Согласно Ph. Eur. 4 суммарное содержание эритромицинов А, B и 

C в субстанции эритромицина должно быть не менее 93,0% и не более 
102,0.  Согласно USP 24 нижняя  граница  суммарного  содержания  дан-
ных эритромицинов составляет 85,0% 

Количественное  определение  полусинтетических  макролидов 

(кларитромицина,  рокситромицина) – более  кислотоустойчивых  по 
сравнению с эритромицином веществ – методом ВЭЖХ проводят в сла-
бокислой  или  нейтральной  среде  на  С

18

-силикагелях.  В  качестве  под-

вижных фаз используют смеси фосфатного буферного раствора с ацето-
нитрилом и (или) метанолом.  

Условия  хроматографического  определения  азитромицина  отли-

чаются от условий определения других макролидов. Согласно Ph. Eur. 4 
неподвижной фазой при ВЭЖХ-определении данного вещества является 
синтетический кремнийорганический полимер,  содержащий на поверх-
ности октадецильные группы и практически не содержащий остаточных 
силанольных групп (для предотвращения возможного взаимодействия с 
веществами  основного  характера).  Подвижной  фазой  является  смесь 

Макролиды 

 

 

101

фосфатного буферного раствора (pH 6,5), ацетонитрила и воды. Опреде-
ление проводят при температуре 70 

°С. 

ВЭЖХ-определение  азитромицина,  согласно USP 24, проводят  в 

сильнощелочной  среде.  Подвижной  фазой  является  смесь  фосфатного 
буферного  раствора (pH 11) и  ацетонитрила.  В  качестве  неподвижной 
фазы  используется  полимер  бутадиена,  содержащий  оксид  алюминия 
(такой сорбент применяется в USP только для азитромицина); детекти-
рование – амперометрическое. 

Для  количественного  определения  макролидов  используют  также 

микробиологический метод анализа; фотометрию, основанную на реак-
циях образования окрашенных соединений, полярографию и т.д. 

Таблица 7 

Условия количественного определения макролидов 

методом ВЭЖХ согласно Ph.Eur. 4 

Вещество 

НФ 

ПФ, скорость 

Детекция, нм 

эритромицин 

сополимер стирола 
и  дивинилбензола 
(8 мкм) с размером 
пор 100 нм 

к 50 мл 35 г/л  раствора 
K

2

HPO

4

,  доведенного  до 

рН 9 разбавленной  фос-
форной  кислотой,  добав-
ляют 400 мл воды, 165 мл 
2-метил-2-пропанола, 30 
мл  ацетонитрила  и  дово-
дят водой до 1000 мл (2,0 
мл/мин), 70 

°С 

215 

кларитромицин  октадецилсилика-

гель (3,5 мкм) 

4,76 г/л раствора KH

2

PO

4

, 

доведенного  до  рН 4,4 
растворами  H

3

PO

4

  или 

KOH,  и  ацетонитрила  в 
различных  соотношениях 
(градиентное  элюирова-
ние) (1,1 мл/мин), 40 

°С 

205 

рокситромицин  сферический  окта-

децилсиликагель 
(5 мкм) с размером 
пор 10 нм  (не  со-
держащий 

оста-

точных  силаноль-
ных групп) 

 смесь (397:693) ацето-
нитрила и 49,1 г/л раство-
ра NH

4

H

2

PO

4

,  доведенно-

го  до  рН 5,3 раствором 
NaOH (1,5 мл/мин), 15 

°С 

205 

азитромицин 

кремнийорганиче-
ский  полимер  с 
привитыми  окта-
децильными  груп-
пами (5 мкм) 

смесь (10:35:55) 34,84 г/л 
раствора  K

2

HPO

4

,  дове-

денного  до  рН 6,5 фос-
форной  кислотой,  ацето-
нитрила  и  воды  (1,0 
мл/мин), 70 

°С 

215 

 

 А.К. Лекции по фармацевтической химии 

 

 

102

Литература 

1.  Макролиды / Под  ред.  А.М.  Попковой,  А.Л.  Вёрткина,  С.В.  Колобова. – 

М.: Диалог-МГУ, 2000. 

2.  Страчунский  Л.С.,  Козлов  С.Н.  Макролиды  в  современной  клинической 

практике. – Смоленск: Русич, 1998. 

3.  Kanfer I., Skinner M.F., Walker R.B. Analysis of macrolide antibiotics // J. 

Chromatogr. – 1998. – Vol. 812. – P. 255 – 286. 

4.  Separation of erythromycin and related substances on base-deactivated re-

versed-phase silica gels columns / H.K. Chepkwony, I. Vanderriest, J.M. Nguyo et al. // J. 
Chromatogr. – 1998. – Vol. 812. – P. 255 – 286.  

 

Как это выглядит