СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

  Главная       Учебники - Газпром      СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 поиск по сайту

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ОТКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО “ГАЗПРОМ” СТАНДАРТ ОРГАНИЗАЦИИ


 

ИНСТРУКЦИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОКСИЧНОСТИ ОТХОДОВ БУРЕНИЯ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОМ

СТО Газпром РД 2.1-129-2005


 

Издание официальное


 


 

 


 

ОТКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО “ГАЗПРОМ”


 

Общество с ограниченной ответственностью “ТюменНИИгипрогаз”

Общество с ограниченной ответственностью “Информационно-рекламный центр газовой промышленности” (ООО “ИРЦ Газпром”)


 

Москва 2005

ПРЕДИСЛОВИЕ


 

РАЗРАБОТАН ООО “ТюменНИИгипрогаз”


 

ВНЕСЕН Управлением по бурению газовых и газоконден- сатных скважин Департамента по добыче газа, газового конденсата, нефти ОАО “Газпром”


 


 

УТВЕРЖДЕН


 

ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ


 

ИЗДАН


 

Заместителем Председателя Правления ОАО “Газпром” А.Г. Ананенковым


 

Распоряжением ОАО “Газпром” от 2.12.2004 г. № 378

с 18.03.2005 г.


 

Обществом с ограниченной ответственностью “Информационно-рекламный центр газовой промышленности” (ООО “ИРЦ Газпром”)


 

Настоящий нормативный документ не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения ОАО “Газпром”


 

image

 ОАО “Газпром”, 2005

 Разработка ООО “ТюменНИИгипрогаз”, 2004

СОДЕРЖАНИЕ

Введение V

  1. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ 1

  2. НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ 1

  3. ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ 2

  4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ИССЛЕДУЕМЫХ

    ОБРАЗЦОВ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОМ 3

    1. Принцип экспрессс-метода 3

    2. Характеристика погрешности 4

    3. Средства измерений 4

    4. Реактивы, материалы, оборудование 4

    5. Требования к квалификации лиц, проводящих биотестирование 5

    6. Процедура выполнения измерений токсичности 5

      1. Условия выполнения измерений 5

      2. Отбор проб и их подготовка 5

      3. Подготовка средств измерений 6

      4. Проведение измерений 7

      5. Требования по безопасности 8

    7. Интерпретация результатов анализа и оформление проктола 8

    8. Порядок оформления результатов определения токсичности

исследуемых образоцов 11

Приложение А (обязательное). Схема отбора проб отходов бурения 12

Приложение Б (обязательное). Форма акта отбора проб 13

Приложение В (рекомендуемое). Форма журнала регистрации

результатов исследований 14

Приложение Г (обязательное). Форма протокола результатов исследований 15

Приложение Д (справочное). Пример определения токсичности компонентов бурового раствора (на примере водного раствора

карболигносульфоната пекового) 16

Приложение Е (справочное). Пример определения токсичности бурового раствора (на примере бурового раствора, приготовленного

в лабораторных условиях) 19

Приложение Ж (справочное). Пример определения токсичности буровых сточных вод (на примере буровых сточных вод после

установок обезвоживания отходов бурения) 22

Приложение И (справочное). Пример определения токсичности

бурового шлама 25

Приложение К (обязательное). Сертификаты на методическое

и приборное обеспечение 28

Библиография 31

ВВЕДЕНИЕ


 

“Инструкция по определению токсичности отходов бурения экспресс-методом” раз- работана с целью ускорения оценки токсичности технологических жидкостей и их исход- ных компонентов, применяемых для их приготовления, а также отходов, образующихся в процессе строительства скважин.

В соответствии с требованиями российского природоохранного законодательства традиционно установление класса опасности для окружающей природной среды загрязни- телей производится методом биотестирования на двух видах гидробионтов из различных систематических групп по наиболее чувствительному тест-объекту. Однако эти методики токсикологического анализа загрязнителей в значительной мере трудоемки, требуют высо- кой квалификации операторов, особых условий культивирования тест-объектов. Экспресс- метод определения токсичности на основе использования биолюминесцирующих бактерий [1-3] лишен указанных выше недостатков.

Настоящая “Инструкция......” разработана на основе лабораторных и эксперименталь- ных исследований, которыми установлено, что результаты определения токсичности пред- ложенным методом для химических реагентов и буровых растворов на их основе, а также отходов бурения (буровой шлам, отработанный буровой раствор) коррелируют с результата- ми исследований на различных видах гидробионтов.

Применение экспресс-метода для определения токсичности загрязнителей (на осно- ве бактерий) снижает время оценки их токсичности и повышает оперативность принятия решений по обращению с отходами бурения.

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 


 

 

ОТКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО “ГАЗПРОМ” СТАНДАРТ ОРГАНИЗАЦИИ


 

image


 

ИНСТРУКЦИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТОКСИЧНОСТИ ОТХОДОВ БУРЕНИЯ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОМ

image


 

Дата введения 2005-03-18


 

1 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ


 

Настоящий стандарт устанавливает процедуру оценки токсичности отходов бурения (отработанных буровых растворов, буровых шламов), многокомпонентных буровых раство- ров, других технологических жидкостей.

Стандарт предназначен для проведения экологического контроля токсичности техно- логических жидкостей и отходов бурения, образующихся при строительстве скважин в усло- виях производственных лабораторий и полевых условиях; для проведения ускоренных (пред- варительных) исследований буровых растворов, приготовленных с использованием новых компонентов для оценки их токсичности и возможности применения в практике буровых ра- бот предприятий ОАО “Газпром”, осуществляющих свою деятельность на месторождениях Крайнего Севера; для проведения сквозного мониторинга токсичности загрязнителей, свя- занных с процессом бурения скважин; для подтверждения класса опасности отходов бурения при взимании платы за их размещение.


 

2 НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ


 

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие нормативные документы: ГОСТ 12.1.004-85 ССБТ. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.019-79 ССБТ. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура ви- дов защиты

ГОСТ 12.4.009-83 ССБТ. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды.

Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 ССБТ. Системы вентиляционные. Общие требования ГОСТ 17.4.3.01-83 Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия


 

image

Издание официальное

ГОСТ 3118-77 Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 4174 Цинк сернокислый 7-водный. Технические условия ГОСТ 4328-77 Натрия гидроокись. Технические условия ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Общие техничес- кие условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия


 

3 ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ


 

В настоящем стандарте применяются следующие термины с соответствующими опре- делениями:

    1. токсичность: Проявление вредного воздействия разнообразных химических соеди- нений и их смесей на тест-объекты, которые могут быть представлены различными экозвень- ями природной среды.

    2. критерий токсичности (индекс токсичности): Достоверное количественное значение тест-параметра, на основании которого делается вывод о токсичности изучаемого объекта.

    3. тест-параметр: Исследуемая функция тест-объекта, в качестве которой могут рас- сматриваться выживаемость, плодовитость, подавление или стимулирование ферментатив- ной и метаболической активности организмов.

    4. тест-реакция: Изменение какого-либо биохимического, морфологического пове- денческого или другого функционального показателя тест-объекта под воздействием токси- канта.

    5. биотестирование: Определение токсичности с помощью тест-объектов, в качестве которых используются живые организмы.

    6. биолюминесценция: Интенсивное свечение в видимой области спектра, отражающее ферментативную функцию и общую метаболическую активность тест-объектов, в качестве которых используются живые организмы.

    7. класс опасности для окружающей природной среды: Показатель, характеризующий отнесение исследованного образца к определенной категории, характеризующейся заданным интервалом токсикологических свойств, отражающих его влияние на объекты окружающей среды.

    8. безвредное разбавление: Величина, показывающая во сколько раз необходимо раз- бавить исследуемую пробу, чтобы ее концентрация соответствовала недействующей концен-

      трации, при которой токсичность исследуемой пробы не превысит 20 % по сравнению с кон- тролем.

    9. пробит-анализ: Вид математического анализа множественной регрессии зависимой переменной с нормально распределенным отклонением.

4 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОМ


 

Измерение токсичности проводится экспресс-методом с использованием в качестве тест-объекта биолюминесцентных микроорганизмов “Эколюм”, а в качестве средства изме- рения прибора экологического контроля “Биотокс-10” (сертификат об утверждении средств измерений RU.С.31.003.А № 9842) в соответствии с методическими рекомендациями [1-4].

4 .1 Принцип экспресс-метода


 

      1. Метод основан на определении изменения интенсивности биолюминесценции генно-инженерного штамма бактерий при воздействии токсических веществ, присутствую- щих в анализируемой пробе по сравнению с контрольной пробой.

      2. В качестве тест-объекта используются люминесцирующие бактерии, содержа- щие фермент люциферазу, который осуществляет трансформацию энергии химических свя- зей метаболитов в световой сигнал на уровне, доступном для экспрессных и количественных измерений. Токсические соединения, влияя на биохимические реакции бактерий, изменяют интенсивность их свечения в видимой области спектра, которое регистрируется люминомет- ром. Уменьшение интенсивности биолюминесценции пропорционально токсическому эф- фекту. Критерием токсического действия является изменение интенсивности люминесцен- ции бактерий в исследуемой пробе по отношению к контролю за определенный период экс- позиции.

      3. Количественная оценка параметра тест-реакции выражается в виде безразмерной величины – индекса токсичности “Т”, равной отношению

        Т=100 (Io-I)/Io, (1)


         

        o

         

        где I

        и I – соответственно интенсивность свечения тест-объекта в контрольной и опытной

        пробах при фиксированном времени экспозиции.

      4. Определение величин эффективных концентраций проводят с использованием гамма-функции, которая представляет собой отношение потери интенсивности свечения к оставшейся интенсивности свечения через определенное время экспозиции. Вычисляются ЕС50 и ЕС20 – эффективные концентрации (или объемы) токсического вещества, которые вы-

зывают уменьшение интенсивности свечения на 50 и 20 % по сравнению с контролем. Для определения гамма-функции готовят серию разбавлений исследуемой пробы (1:1, 1:2, 1:4, 1:8) и измеряют свечение. Гамма-функцию рассчитывают по формуле:

G= (Iо-I)/I, (2)

где Iо и I – соответственно интенсивность свечения контрольной и опытной пробы при фик- сированном времени экспозиции.

    1. Характеристика погрешности


       

      Погрешность определяемого индекса токсичности пробы составляет ±19,6 % (), нор- матив оперативного контроля воспроизводимости 27,7 % (Dотн).

    2. Средства измерений


       

      1. Тест-объект биосенсор “Эколюм” (ТУ 6-09-20-236-93) представляет собой лио- филизированные культуры люминесцирующих бактерий, которые до начала анализа нахо- дятся в среде инертных газов в специальных флаконах.

      2. Специализированный люминометр “Биотокс” – измерительный прибор, пред- назначенный для проведения оценки токсичности объектов окружающей среды, с использо- ванием микробных биосенсоров “Эколюм”. Принцип работы прибора “Биотокс” основан на регистрации слабых световых потоков биосенсора “Эколюм” с помощью фотоэлектронного умножителя (ФЭУ), работающего в режиме счета анодных импульсов. Сигнал с ФЭУ измеря- ется с помощью микроЭВМ, результат выводится на девятиразрядный цифровой индикатор. Спектральный диапазон длин волн регистрируемого свечения составляет 300-600 нм. Об-

ласть максимальной спектральной чувствительности ФЭУ располагается в диапазоне 380-490 нм. Питание люминометра осуществляется через адаптер от сети переменного тока 220 В, 50 гц или от автономной аккумуляторной батареи.

    1. Реактивы, материалы, оборудование


       

      1. Прибор “Биотокс-10” (ТУ-446-У-028-00-ОТУ) для измерения биолюминесцен- ции, с набором кювет объемом 1,5 мл.

      2. Весы лабораторные общего назначения 3 класса с пределом допустимой погреш- ности 2 мг по ГОСТ 24104.

      3. Посуда мерная лабораторная стеклянная по ГОСТ 1770.

      4. Воронки лабораторные по ГОСТ 25336.

      5. Бюксы для взвешивания диаметром 30, 40 мм.

      6. Сушильный электрический шкаф.

      7. Дозаторы автоматические, 1 мл ± 1%, 10 мл ± 1%.

      8. рН-метр.

      9. Бумажные фильтры обеззоленные типа ФОБ (красная, белая ленты) по ГОСТ 12026.

      10. Бумага индикаторная универсальная для измерения рН.

      11. Препарат лиофилизированных люминесцентных бактерий “Эколюм” ТУ-6-09-20-236-93.

      12. Цинк сернокислый 7-водный (модельный токсикант) по ГОСТ 4174.

      13. Натрия гидроокись, х.ч. по ГОСТ 4328.

      14. Соляная кислота, х.ч. по ГОСТ 3118.

      15. Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.

      16. Аппараты для встряхивания, тип АВУ-1, ВУ-10 Р, ТУ 64-1-1081.

      17. Холодильник бытовой, обеспечивающий хранение проб (+2 -+4 оС).

      18. Часы сигнальные ТУ 25-07-57.

      19. Подставка для измерительных кювет.

      20. Банки стеклянные с навинчивающейся крышкой для отбора и хранения проб.

      21. Шпатели или лопатки для отбора проб.


 

    1. Требования к квалификации лиц, проводящих биотестирование


       

      Определение токсичности по данной методике может выполняться оператором с ква- лификацией “лаборант”, имеющим опыт работы в области водной токсикологии не менее од- ного года.

    2. Процедура выполнения измерений токсичности


       

      1. Условия выполнения измерений

        1. Температура воздуха в помещении +15-+25 оС.

        2. Освещение естественное или искусственное, не менее 300 люкс.

      1. Отбор проб и их подготовка

        1. Отбор проб отходов бурения производится: буровых сточных вод (БСВ) из ем- костей сбора БСВ; отработанных буровых растворов (ОБР) – из емкостей хранения бурового раствора; бурового шлама (БШ) – из системы транспортировки шламовой массы после се- рийных средств очистки бурового раствора; всех видов отходов из шламонакопителя. Схема точек отбора проб приводится в приложении А.

        2. Отбор пробы производится непосредственно из емкости или накопителя. От- бор производится не менее чем в пяти точках, после чего путем смешения проб готовится объединенная проба.

        3. Отбор проб отходов бурения производится каждый раз при изменении системы обработки буровых растворов.

        4. В лабораторных условиях для исследования токсичности новых химреагентов и буровых растворов готовят их растворы согласно разработанным рецептурам.

        5. Объем пробы для анализа должен составлять 200 мл для жидких отходов, 100 г для твердых и пастообразных.

        6. Отбор и хранение проб производится в стеклянной посуде. Посуда для отбора и хранения проб отходов бурения должна быть химически чистой.

        7. Посуда, наполненная пробой, подписывается с указанием вида отхода, места и даты отбора. На каждую пробу заполняется акт отбора с указанием места, условий отбора, за подписью лиц производивших отбор. Форма актов отбора проб приводится в приложении Б.

        8. Отбор проб осуществляется стандартными пробоотборниками.

        9. Не допускается консервирование проб, предназначенных для исследования на токсичность.

        10. Пробы должны быть подвергнуты анализу не позднее 24 ч с момента их отбора. Допускается хранение пробы в холодильнике в естественно влажном состоянии при темпе- ратуре от +2 до +4 оС в банках с плотно завинченной крышкой не более одной недели с момента отбора проб.

        11. Перед началом испытаний готовят водные фильтраты исследуемых проб. Для этого буровую сточную воду и отработанный буровой раствор, растворы химреагентов фильт- руют через бумажный фильтр до получения прозрачного фильтрата, который хранят в стек- лянной посуде и затем используют для тестирования. При подготовке пробы бурового шла- ма, а также отработанного бурового раствора высокой плотности, отфильтровать который че- рез бумажный фильтр не представляется возможным, готовят их водную вытяжку. Пробу шлама или отработанного бурового раствора высушивают при комнатной температуре в вы- тяжном шкафу или в хорошо проветриваемом помещении в стеклянных кристаллизаторах до естественно сухого состояния. Затем к 10 ± 0,1 г высушенного шлама добавляют 50 мл дис- тиллированной воды и выдерживают три часа с перемешиванием на аппарате для встряхива- ния. Жидкую часть отфильтровывают через бумажный фильтр до получения прозрачной вод- ной вытяжки, которую затем используют для тестирования. Прозрачность водной вытяжки оценивают визуально.

      1. Подготовка средств измерений

        1. Для перевода биореагента “Эколюм” в рабочее состояние во флакон с бактерия- ми добавить 10 мл охлажденной до 4-8 оС дистиллированной воды рН 7,0-7,4; встряхнуть не-

          сколько раз флакон с суспензией бактерий; выдержать в холодильнике 30 мин (при темпера- туре +2 -+4 оС) , после чего подготовленную рабочую суспензию бактерий оставить на 30 мин при комнатной температуре (15-25 оС).

        2. Подготовку прибора “Биотокс-10” к выполнению измерений провести в соот- ветствии с руководством по эксплуатации.

        3. Рабочую суспензию бактерий следует перемешать путем встряхивания флакона. В случае не полного растворения биосенсора в дистиллированной воде рекомендуется после энергичного встряхивания отфильтровать суспензию бактерий через бумажный фильтр.

        4. Для определения рабочей концентрации биосенсора “Эколюм” измерить фо- новое значение прибора “Биотокс” (по инструкции к прибору) и записать это значение. До- бавить 0,1 мл суспензии бактерий из флакона в кювету люминометра. Затем туда же добавить 0,9 мл дистиллированной воды (рН 7,0-7,4, комнатная температура). Измерить величину био- люминесценции кюветы с биореагентом. Свечение рабочей суспензии бактерий должно пре- вышать фоновое значение прибора в 25-250 раз. Если эта величина меньше, то необходимо увеличить добавку биосенсора (на 0,1 мл) и повторить измерение. Если величина больше интер- вала, то следует разбавить суспензию бактерий дистиллированной водой и повторить измерение.

        5. Проверить чувствительность биосенсора “Эколюм”, анализируя действие на него раствора, содержащего 4,4 мг/л цинка сернокислого 7-водного (модельный токсикант). При времени инкубации 30 мин модельный токсикант должен вызывать уменьшение интен- сивности биолюминесценции не менее, чем на 50 % по сравнению с контролем. Если это отношение меньше двух, то производится замена на биосенсор из нового флакона.

      1. Проведение измерений

        1. Отобрать из флакона по 0,1 мл рабочей суспензии бактерий и добавить в три контрольные кюветы и три кюветы для анализируемой пробы. Добавить в контрольные кю- веты по 0,9 мл дистиллированной воды. В остальные кюветы добавить по 0,9 мл анализируе- мой пробы и зафиксировать время экспозиции.

        2. Время экспозиции исследуемого образца с биосенсором должно быть строго фик- сированным. Рекомендуемый интервал времени экспозиции, характеризующийся наимень- шей погрешностью результатов измерений 60 мин в лабораторных условиях. В полевых усло- виях рекомендуемый интервал времени экспозиции 30 мин.

        3. Измерить значение интенсивности свечения контрольной пробы, затем опыт- ной пробы. Для этого вставить кювету с контрольным образцом в кюветное отделение прибо- ра, нажать кнопку “контроль”, через 10 сек на индикационном табло появляется усредненная величина интенсивности люминесценции тест-объекта в относительных единицах.

          Вставить кювету с опытным образцом в кюветное отделение, нажать кнопку “проба”, через 10 секунд на индикационном табло появляется величина интенсивности люминесценции бак- терий после воздействия испытуемой пробы. В контроле и опыте следует использовать по три повторности. Нажать кнопку “токсичность” – на индикационном табло появляется значение индекса токсичности (в относительных единицах). Повторить операции для пар контроль- опыт (для одного измеряемого образца), для выявления среднего арифметического значения токсичности и ошибки нажать кнопку “среднее”, затем кнопку “ошибка”. Нажать кнопку “лю- минометр” для обнуления памяти прибора.

        4. Для выявления влияния рН на токсичность исследуемой пробы измерить ее рН, и если величина рН находится за пределами 6,5-8,0, привести рН к значению 7,0-7,4 путем добавления к анализируемой пробе 0,1 н раствора соляной кислоты (для уменьшения рН) или гидроксида натрия (для увеличения рН). Затем провести измерение токсичности.

        5. Для определения концентраций исследуемой пробы, характеризующейся 20 %

20

 

(ЕС

50

 

) и 50 % (ЕС

) ингибированием токсичности по сравнению с контролем, приготовить

серию разбавлений исследуемой пробы (1:1, 1:2, 1:4, 1:8), затем провести измерение токсич- ности в соответствии с п.п. 4.6.4.1-4.6.4.3. Нажать кнопку “ЕС”, при этом поочередно прове- сти измерение индекса токсичности разбавлений (1:1, 1:2, 1:4, 1:8) в сравнении с контролем. При измерениях индекса токсичности каждого разбавления дополнительно используется кнопка “G- функция”. По окончании измерений последовательно нажать кнопки “ЕС20”,

“ЕС50” – высвечиваются значения соответствующих эффективных концентраций. Для выхо-

да в стандартный режим измерения токсичности используется кнопка “люминометр”.

      1. Требования по безопасности

        1. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безо- пасности по ГОСТ 12.1.004 и по ГОСТ 12.4.009.

        2. Безопасность работы с химическими реагентами обеспечивается наличием вен- тиляционных систем в соответствии с требованиями ГОСТ 12.4.021.

        3. При работе с электрооборудованием безопасность обеспечивается по ГОСТ 12.1.019.

        4. Лиофилизированные бактерии, используемые в качестве биотеста “Эколюм”, не патогенны, однако для их полного обезвреживания необходимо стерилизовать использо- ванную посуду и остатки использованных растворов в сушильном шкафу при 105 оС в тече- ние 1 ч, после чего остатки могут размещаться в общей системе сбора лабораторных отходов.

    1. Интерпретация результатов анализа и оформление протокола


       

      1. Рассчитывается среднеарифметическое значение величины токсичности Т из трех параллельных измерений контроль-опыт. Прибор “Биотокс” вычисляет индекс токсичности автоматически при нажатии кнопки “среднее”.

      2. По величине индекса токсичности исследованные пробы относятся к одной из следующих групп (табл. 1). В ряде случаев возможен вариант, когда интенсивность биолюми- несценции в анализируемой пробе больше, чем в контроле. В таком случае независимо от величины отрицательного значения “Т” делается вывод об отсутствии токсичности образца, и индекс токсичности принимает нулевое значение.


         

        Градация степени токсичности в зависимости от величины Т

        Таблица 1


         

        image


         

      3. Для вычисления безвредной кратности разбавления исследуемой пробы, которое соответствует 20 % ингибированию биолюминесценции по сравнению с контролем, исполь- зуется графический метод. Для этого результаты измерения токсичности заносятся в табл. по форме табл. В.1 прилож. В.

      4. Для вычисления пробитных величин процентов изменения тест-реакции исполь- зуют табл. 2 [ 2 ].


         

        Значения пробитов для экспериментально установленного изменения тест-реакции

        Таблица 2


         

        image


         

      5. По значениям пробитов (ось ординат) и значениям десятичных логарифмов кон- центраций (разбавлений) (ось абсцисс) строят график в программе Excel, указывая в опера- ции “тип диаграммы “ параметр “точечная”. Уравнение прямой, описывающее взаимосвязь между этими величинами, получают следующим образом: в параметре “диаграмма” указыва-

        image

        image

        image

        image

        image

        ют “добавить линию тренда”. В операции “линия тренда”, “параметры” помечается галочкой окошко “уравнение на диаграмме”. Примеры полученных таким образом уравнений концен- траций (разбавлений) приводятся на рис. 1, 2.


         

        image image


         

        image image image image image image


         

        image

        image

        image

        image

        image

        image

        image

        image

        image

        image

        Рис. 1. График уравнения концентраций


         


         

        image image


         

        image image image image image image image

        image

        image

        image

        image

        image

        Рис. 2. График уравнения разбавлений


         

      6. Из полученного уравнения концентраций и разбавлений получают значения величин х=lg C, соответствующие величинам (значениям пробитов). Пробитное значение 5,0 соответствует логарифму концентрации исследуемого вещества, вызывающее ингибиро- вание тест-функции на 50 %, а пробитное значение 4,16 соответствует логарифму концент-

        рации исследуемого вещества, вызывающее ингибирование тест-функции на 20 % по сравне- нию с контролем (безвредная концентрация).

      7. Для вычисления безвредной кратности разбавления в уравнение разбавлений под- ставляют значение у, равное 4,16, и находят антилогарифм полученного результата х (без- вредную кратность разбавления). Для вычисления недействующей (безвредной) концентра- ции в уравнение концентраций подставляют значение у, равное 4,16, и находят антилога- рифм полученного результата х (безвредную концентрацию).

      8. В случае автоматического вычисления величин эффективных концентраций при- бором “Биотокс - 10” величины ЕС50 и ЕС20 фиксируются при проведении исследований по схеме приведенной в п.4.6.4.5.

4.7. 9 Отнесение отхода к классу опасности провести по кратности разведения водной вытяжки, при котором не выявлено воздействие на гидробионтов (разбавление исходной ис- следуемой пробы, соответствующее ЕС20) в соответствии с табл. 3.


 

Критерии отнесения отходов к классам опасности для окружающей природной среды

Таблица 3


 

image


 

4.7.10 Результаты измерений оформляются протоколом. Пример записи приводится в приложении Г.

    1. Порядок оформления результатов определения токсичности исследуемых образцов


       

      1. Результаты измерения токсичности исследуемых образцов заносятся в журнал по форме таблицы В.1 приложения В. Протоколы исследований (приложение Г) вместе с актами отбора проб (приложение Б) передаются в отдел охраны окружающей среды буровой организации, а также предприятим – недропользователям (по требованию).

      2. Акты отбора проб и протоколы исследований в случае необходимости могут пре- доставляться контролирующим органам в области экологического контроля.

      3. Вся документация по результатам исследования образцов на показатель токсич- ности архивируется и хранится в лаборатории, выполняющей анализы, не менее 3-х лет со дня внесения последней записи в них.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(обязательное)


 

СХЕМА ОТБОРА ПРОБ ОТХОДОВ БУРЕНИЯ


 

image


 

Рис. А.1

ПРИЛОЖЕНИЕ Б

(обязательное)


 

АКТ

отбора проб


 

“ ”

200 г.


 

Место отбора проб (наименование месторождения, № куста, № скважины, интервал бурения)


 


 

image


 


 

image


 

Наименование и адрес организации, где производился отбор проб


 


 

image


 

Цель отбора Испытание по показателям токсичности в соответствии с требованиями “Инст- рукции по определению токсичности отходов бурения экспресс-методом”


 

image


 

Вид отобранной пробы (отработанный буровой раствор, буровой шлам, технологический раствор)


 


 

image


 

Дата отбора пробы Количество отобранных проб


 

упаковочные единицы

Количество одной отобранной пробы (масса, объем)


 

От буровой организации (буровой мастер)


 

image

подпись, инициалы, фамилия


 

От испытательной лаборатории (инженер-эколог, лаборант)


 

image

подпись, инициалы, фамилия


 

14

 

ПРИЛОЖЕНИЕ В

(рекомендуемое)


 

ФОРМА ЗАПИСИ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ ИССЛЕДУЕМОЙ ПРОБЫ


 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

ТАБЛИЦА В 1


 

image

ПРИЛОЖЕНИЕ Г

(обязательное)


 

Протокол №


 


 

определения токсичности


 

image

Дата проведения биотестирования Время экспозиции рН пробы


 

(название пробы)


 

Наименование показателя

Результаты биотестирования

Индекс токсичности, Тср

 

Погрешность измерения

 

Безвредная кратность разбавления

 


 

Вывод:


 


 

image


 

Анализ выполнил Инженер-эколог (лаборант лаборатории

экологического мониторинга)


 

Зав. лабораторией экологического мониторинга

ПРИЛОЖЕНИЕ Д

(справочное)


 

Пример определения токсичности компонента бурового раствора ( на примере водного раствора карболигносульфоната пекового )

Д. 1 В лабораторных условиях приготовьте водный раствор карболигносульфоната пе- кового в стандартной 4 % концентрации, применяемой в составе буровых растворов, в коли- честве 400 мл (проба № 1).

Д. 2 С помощью рН метра измерьте рН пробы № 1.

Д. 3 Для исследования влияния рН на токсичность пробы из стакана с пробой № 1 отлейте в химически чистый стакан 100 мл раствора, проведите корректировку рН 0,1 н раство- ром гидроксида натрия до рН 6,0-8,0 ( проба № 2). Проверьте рН пробы № 2 с помощью рН метра. Д. 4 Для оценки влияния условий скважины на токсичность пробы из стакана с про-

бой № 1 отлейте 200 мл в стакан и протермостатируйте в вальцовой печи с программируемым таймером OFITE (100 оС, 80 атм, 2 ч) (проба № 3).

Д. 5 В случае высокой мутности проб отфильтруйте их через бумажный фильтр. Для определения токсичности используйте прозрачный фильтрат.

Д. 6 Приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм”. Для этого во флакон с лиофилизированными бактериями добавьте 10 мл охлажденной до 4-8 оС дистиллированной воды рН 7,0-7,4; встряхните несколько раз флакон с суспензией бактерий; выдержите в холо- дильнике 30 мин, после чего подготовленную рабочую суспензию бактерий выдержите 30 мин при комнатной температуре (15-25 оС).

Д. 7 Подключите прибор “Биотокс-10” к сети с помощью сетевого адаптера. Включите прибор с помощью переключателя, расположенного на лицевой панели прибора. На дисплее появится информация о времени обратного отсчета, через 30 с прибор готов к работе.

Д. 8 Проверьте чувствительность рабочей суспензии бактерий. Для этого возьмите две кюветы, в обе поместите по 0,1 мл рабочей суспензии биосенсора “Эколюм”. В контрольную кювету поместите 0,9 мл дистиллированной воды, в опытную – 0,9 мл модельного токсиканта – раствора, содержащего 4,4 мг/л цинка сернокислого. При 30-минутном интервале экспозиции должно происходить не менее, чем 50 % подавление люминесценции в опыте по сравнению с контролем. Если эта величина меньше, приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм” из нового флакона.

Д. 9 Нажмите клавишу “время”, затем последовательно нажмите клавиши “600” для установления интервала времени измерения параметров прибора, равного 10 мин. Нажмите клавишу “контроль”, через 10 мин на дисплее появляется уровень нулевого сигнала, который должен быть не менее 200 имп/с.

Д. 10 Установите кювету с контрольным образцом биосенсора в кюветное отделение люминометра и измерьте величину люминесценции. Интенсивность свечения суспензии бак- терий должна превышать уровень нулевого сигнала в 25-250 раз. Если это значение меньше, во все кюветы добавьте по 0,2 мл суспензии биосенсора; если эта величина больше, разбавьте рабочую суспензию бактерий.

Д. 11 Для измерения уровня токсичности проб установите интервал времени измере- ния, равным 10 с.

Д. 12 Для каждой пробы в подставку поместите по 7 кювет. 3 кюветы для пробы с разведением 1: 0, 4-7-я кюветы для разведений исследуемой пробы 1:1, 1:2, 1:4, 1:8. На каждой кювете зафиксируйте соответствующее разведение.

Д. 13 В каждую кювету поместите 0,1 мл рабочей суспензии “Эколюм”. В кюветы

№ 1-3 поместите по 0,9 мл исследуемой пробы, в кювету № 4 - 4,5 мл воды и 4,5 мл пробы; в кювету № 5 – 6 мл воды и 3 мл пробы; в кювету № 6 – 7,2 мл воды и 1,8 мл пробы; в кювету

№ 4 – 8,0 мл воды и 1,0 мл пробы. Объем добавляемой суспензии бактерий в контрольную и опытные кюветы должен быть одинаковый.

Д. 14 Измерьте свечение контрольной пробы, поместив контрольную кювету в кювет- ное отделение и нажав кнопку “контроль”. Измерьте свечение опытной пробы, поместив кювету с исследуемой пробой в кюветное отделение и нажав кнопку “проба”. Таким образом последовательно проведите измерение интенсивности свечения кювет контроль – кювета

№ 1, контроль – кювета № 2, контроль – кювета № 3. Нажмите кнопку “токсичность” – выс- вечивается среднее значение токсичности исследуемой пробы, нажмите кнопку “ошибка” – высвечивается значение стандартного отклонения значения токсичности по измеренным зна- чениям. Запишите полученные значения.

Д. 15 Измерьте значения токсичности стандартных разбавлений исследуемой пробы. Для этого нажмите кнопку “ЕС”. Измерьте интенсивность люминесценции контрольной пробы и кюветы № 4 (разведение 1:1), нажмите кнопку “токсичность” – запишите значение токсичнос- ти, нажмите кнопку “G-функция” – запишите значение G-функции. Аналогично проведите

измерения токсичности проб № 5,6,7. После окончания измерений нажмите кнопку “ЕС20”,

затем “ЕС

50

 

” – высвечиваются соответствующие значения. Запишите полученные значения.

Д. 16 Аналогично проведите измерения токсичности и G-функции пробы № 2, 3. Д. 17 Заполните протокол биотестирования по форме приложения Г.

Д. 18 Результаты определения токсичности проб в рассматриваемом примере приво- дятся в табл. Д. 1.


 


 

Результаты измерения токсичности

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

18

 

Таблица Д.1


 


 

image

ПРИЛОЖЕНИЕ Е

(справочное)


 

ПРИМЕР ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ БУРОВОГО РАСТВОРА (НА ПРИМЕРЕ БУРОВОГО РАСТВОРА, ПРИГОТОВЛЕННОГО

В ЛАБОРАТОРНЫХ УСЛОВИЯХ)


 

Е. 1 В лабораторных условиях приготовьте буровой раствор в соответствии с рецепту- рой, указанной в СТП 39-2.1-001-2001 “Стандарт предприятия ДООО “Бургаз”. Буровые ра- створы. Состав и технология применения для строительства скважин на Крайнем Севере” для бурения скважин в количестве 400 мл (проба № 1).

Е. 2 Для оценки влияния условий скважины на токсичность пробы из стакана с про- бой № 1 отлейте 200 мл в стакан и протермостатируйте в вальцовой печи с программируемым таймером OFITE (100 оС, 80 атм, 2 ч) (проба № 2).

Е. 3 Отфильтруйте пробы через бумажный фильтр. Для определения токсичности ис- пользуйте прозрачный фильтрат.

Е. 4 В случае, если получить фильтрат не представляется возможным, высушите пробу в вытяжном шкафу до естественно сухого состояния, отвесьте 10 ± 0,01г высушенной пробы, поместите навеску в колбу, добавьте к навеске 50 мл дистиллированной воды. Содержимое колбы перемешайте на установке для встряхивания в течение 3-х часов и затем отфильтруйте через бумажный фильтр до получения прозрачного фильтрата (проба № 1). Аналогичную про- цедуру проведите с пробой № 2.

Е. 5 С помощью рН метра измерьте рН фильтрата пробы № 1, 2.

Е. 6 Приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм”. Для этого во флакон с лиофилизированными бактериями добавьте 10 мл охлажденной до 4-8 оС дистиллированной воды рН 7,0-7,4; встряхните несколько раз флакон с суспензией бактерий; выдержите в холо- дильнике 30 мин, после чего подготовленную рабочую суспензию бактерий выдержите 30 мин при комнатной температуре (15-25 оС).

Е. 7 Подключите прибор “Биотокс-10” к сети с помощью сетевого адаптера. Включите прибор с помощью переключателя, расположенного на лицевой панели прибора. На дисплее появится информация о времени обратного отсчета, через 30 с прибор готов к работе.

Е. 8 Проверьте чувствительность рабочей суспензии бактерий. Для этого возьмите две кю- веты, в обе поместите по 0,1 мл рабочей суспензии биосенсора “Эколюм”. В контрольную кювету поместите 0,9 мл дистиллированной воды, в опытную – 0,9 мл модельного токсиканта – раство- ра, содержащего 4,4 мг/л цинка сернокислого. При 30-минутном интервале экспозиции должно про- исходить не менее, чем 50 % подавление люминесценции в опыте по сравнению с контролем. Если эта величина меньше, приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм” из нового флакона.

Е. 9 Нажмите клавишу “время”, затем последовательно нажмите клавиши “600” для установления интервала времени измерения параметров прибора, равного 10 мин. Нажмите клавишу “контроль”, через 10 мин на дисплее появляется уровень нулевого сигнала, который должен быть не менее 200 имп/с.

Е. 10 Установите кювету с контрольным образцом биосенсора в кюветное отделение люминометра и измерьте величину люминесценции. Интенсивность свечения суспензии бак- терий должна превышать уровень нулевого сигнала в 25-250 раз. Если это значение меньше, во все кюветы добавьте по 0,2 мл суспензии биосенсора; если эта величина больше, разбавьте рабочую суспензию бактерий.

Е. 11 Для измерения уровня токсичности проб установите интервал времени измере- ния равным 10 с.

Е. 12 Для каждой пробы в подставку поместите по 7 кювет. 3 кюветы для пробы с разве- дением 1:0, 4-7-я кюветы для разведений исследуемой пробы 1:1, 1:2, 1:4, 1:8. На каждой кю- вете зафиксируйте соответствующее разведение.

Е. 13 В каждую кювету поместите 0,1 мл рабочей суспензии “Эколюм”. В кюветы

№ 1-3 поместите по 0,9 мл исследуемой пробы, в кювету № 4 – 4,5 мл воды и 4,5 мл пробы; в кювету № 5 – 6 мл воды и 3 мл пробы; в кювету № 6 – 7,2 мл воды и 1,8 мл пробы; в кювету

№ 4 – 8,0 мл воды и 1,0 мл пробы. Объем добавляемой суспензии бактерий в контрольную и опытные кюветы должен быть одинаковый.

Е. 14 Измерьте свечение контрольной пробы, поместив контрольную кювету в кювет- ное отделение и нажав кнопку “контроль”. Измерьте свечение опытной пробы, поместив кювету с исследуемой пробой в кюветное отделение и нажав кнопку “проба”. Таким образом последовательно проведите измерение интенсивности свечения кювет: контроль - кювета

№ 1, контроль – кювета № 2, контроль – кювета № 3. Нажмите кнопку “токсичность” – выс- вечивается среднее значение токсичности исследуемой пробы, нажмите кнопку “ошибка” – высвечивается значение стандартного отклонения значения токсичности по измеренным зна- чениям. Запишите полученные значения.

Е. 15 Измерьте значения токсичности стандартных разбавлений исследуемой пробы. Для этого нажмите кнопку “ЕС”. Измерьте интенсивность люминесценции контрольной про- бы и кюветы № 4 (разведение 1:1), нажмите кнопку “токсичность” – запишите значение ток- сичности, нажмите кнопку “G-функция” – запишите значение G-функции. Аналогично про- ведите измерения токсичности проб № 5, 6, 7. После окончания измерений нажмите кнопку “ЕС20”,

50

 

затем “ЕС

” – высвечиваются соответствующие значения. Запишите полученные значения.

Е. 16 Аналогично проведите измерения токсичности и G-функции пробы № 2. Е. 17 Заполните протокол биотестирования по форме приложения Г.

Е. 18 Результаты определения токсичности проб в рассматриваемом примере приво- дятся в табл. Е. 1.


 


 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

21

 

Результаты измерения токсичности


 

Таблица Е.1


 

image

ПРИЛОЖЕНИЕ Ж

(справочное)


 

ПРИМЕР ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ БУРОВЫХ СТОЧНЫХ ВОД (НА ПРИМЕРЕ БУРОВЫХ СТОЧНЫХ ВОД ПОСЛЕ УСТАНОВОК ОБЕЗВОЖИВАНИЯ ОТХОДОВ БУРЕНИЯ )


 

Ж. 1 Из мерника буровых сточных вод отберите пробу для анализа в количестве 200 мл (проба № 1).

Ж. 2 С помощью рН метра измерьте рН пробы № 1.

Ж. 3 Отфильтруйте объемы пробы № 1 через бумажный фильтр. Для определения ток- сичности используйте прозрачный фильтрат.

Ж. 4 Приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм”. Для этого во флакон с лиофилизированными бактериями добавьте 10 мл охлажденной до 4-8 оС дистиллированной воды рН 7,0-7,4; встряхните несколько раз флакон с суспензией бактерий; выдержите в холо- дильнике 30 мин, после чего подготовленную рабочую суспензию бактерий выдержите 30 мин при комнатной температуре (15-25 оС).

Ж. 5 Подключите прибор “Биотокс-10” к сети с помощью сетевого адаптера. Включите прибор с помощью переключателя, расположенного на лицевой панели прибора. На дисплее появится информация о времени обратного отсчета, через 30 с прибор готов к работе.

Ж. 6 Проверьте чувствительность рабочей суспензии бактерий. Для этого возьмите две кюветы, в обе поместите по 0,1 мл рабочей суспензии биосенсора “Эколюм”. В контрольную кювету поместите 0,9 мл дистиллированной воды, в опытную – 0,9 мл модельного токси- канта – раствора, содержащего 4,4 мг/л цинка сернокислого. При 30-минутном интервале экспозиции должно происходить не менее, чем 50 % подавление люминесценции в опыте по сравнению с контролем. Если эта величина меньше, приготовьте рабочую суспензию биосен- сора “Эколюм” из нового флакона.

Ж. 7 Нажмите клавишу “время”, затем последовательно нажмите клавиши “600” для установления интервала времени измерения параметров прибора, равного 10 мин. Нажмите клавишу “контроль”, через 10 мин на дисплее появляется уровень нулевого сигнала, который должен быть не менее 200 имп/с.

Ж. 8 Установите кювету с контрольным образцом биосенсора в кюветное отделение люминометра и измерьте величину люминесценции. Интенсивность свечения суспензии бак- терий должна превышать уровень нулевого сигнала в 25-250 раз. Если это значение меньше, во все кюветы добавьте по 0,2 мл суспензии биосенсора; если эта величина больше, разбавьте рабочую суспензию бактерий.

Ж. 9 Для измерения уровня токсичности проб установите интервал времени измерения равным 10 с.

Ж. 10 Для каждой пробы в подставку поместите по 7 кювет. 3 кюветы для пробы с разведением 1:0, 4-7-я кюветы для разведений исследуемой пробы 1:1, 1:2, 1:4, 1:8. На каждой кювете зафиксируйте соответствующее разведение.

Ж. 11 В каждую кювету поместите 0,1 мл рабочей суспензии “Эколюм”. В кюветы № 1-3 поместите по 0,9 мл исследуемой пробы, в кювету № 4-4,5 мл воды и 4,5 мл пробы; в кювету

№ 5-6 мл воды и 3 мл пробы; в кювету № 6-7,2 мл воды и 1,8 мл пробы; в кювету № 4-8,0 мл воды и 1,0 мл пробы. Объем добавляемой суспензии бактерий в контрольную и опытные кю- веты должен быть одинаковый.

Ж. 12 Измерьте свечение контрольной пробы, поместив контрольную кювету в кювет- ное отделение и нажав кнопку “контроль”. Измерьте свечение опытной пробы, поместив кювету с исследуемой пробой в кюветное отделение и нажав кнопку “проба”. Таким образом последовательно проведите измерение интенсивности свечения кювет: контроль – кювета

№ 1, контроль – кювета № 2, контроль – кювета № 3. Нажмите кнопку “токсичность” – выс- вечивается среднее значение токсичности исследуемой пробы, нажмите кнопку “ошибка” – высвечивается значение стандартного отклонения значения токсичности по измеренным зна- чениям. Запишите полученные значения.

Ж. 13 Измерьте значения токсичности стандартных разбавлений исследуемой пробы. Для этого нажмите кнопку “ЕС”. Измерьте интенсивность люминесценции контрольной про- бы и кюветы № 4 (разведение 1:1), нажмите кнопку “токсичность” – запишите значение ток- сичности, нажмите кнопку “G-функция” – запишите значение G-функции. Аналогично про- ведите измерения токсичности проб № 5, 6, 7. После окончания измерений нажмите кнопку

“ЕС20”, затем “ЕС50” – высвечиваются соответствующие значения. Запишите полученные значения.

Ж. 14 Заполните протокол биотестирования по форме приложения Г.

Ж. 15 Результаты определения токсичности проб в рассматриваемом примере приво- дятся в табл. Ж.1.


 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

24

 

Таблица Ж.1


 

Результаты измерения токсичности


 


 

image

ПРИЛОЖЕНИЕ И

(справочное)


 

ПРИМЕР ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ БУРОВОГО ШЛАМА


 

И. 1 Из системы сбора отходов бурения отберите 100 г пробы (буровой шлам) (проба № 1). И. 2 Пробу высушите в вытяжном шкафу до естественно сухого состояния.

И. 3 На лабораторных весах отвесьте 10 ± 0,01г высушенной пробы, поместите навеску в колбу, добавьте к навеске 50 мл дистиллированной воды. Содержимое колбы перемешиваем на установке для встряхивания в течение 3-х ч и затем фильтруем через бумажный фильтр до получения прозрачного фильтрата (проба № 1).

И. 4 С помощью рН метра измерьте рН пробы № 1.

И. 5 Приготовьте рабочую суспензию биосенсора “Эколюм”. Для этого во флакон с лиофилизированными бактериями добавьте 10 мл охлажденной до 4-8 оС дистиллированной воды рН 7,0-7,4; встряхните несколько раз флакон с суспензией бактерий; выдержите в холо- дильнике 30 мин, после чего подготовленную рабочую суспензию бактерий выдержите 30 мин при комнатной температуре (15-25 оС).

И. 6 Подключите прибор “Биотокс-10” к сети с помощью сетевого адаптера. Включите прибор с помощью переключателя, расположенного на лицевой панели прибора. На дисплее появится информация о времени обратного отсчета, через 30 с прибор готов к работе.

И. 7 Проверьте чувствительность рабочей суспензии бактерий. Для этого возьмите две кюветы, в обе поместите по 0,1 мл рабочей суспензии биосенсора “Эколюм”. В контрольную кювету поместите 0,9 мл дистиллированной воды, в опытную – 0,9 мл модельного токси- канта – раствора, содержащего 4,4 мг/л цинка сернокислого. При 30-минутном интервале экспозиции должно происходить не менее, чем 50 % подавление люминесценции в опыте по сравнению с контролем. Если эта величина меньше, приготовьте рабочую суспензию биосен- сора “Эколюм” из нового флакона.

И. 8 Нажмите клавишу “время”, затем последовательно нажмите клавиши “600” для установления интервала времени измерения параметров прибора, равного 10 мин. Нажмите клавишу “контроль”, через 10 мин на дисплее появляется уровень нулевого сигнала, который должен быть не менее 200 имп/с.

И. 9 Установите кювету с контрольным образцом биосенсора в кюветное отделение люминометра и измерьте величину люминесценции. Интенсивность свечения суспензии бак- терий должна превышать уровень нулевого сигнала в 25-250 раз. Если это значение меньше, во все кюветы добавьте по 0,2 мл суспензии биосенсора; если эта величина больше, разбавьте рабочую суспензию бактерий.

И. 10 Для измерения уровня токсичности проб установите интервал времени измере- ния равным 10 с.

И. 11 Для каждой пробы в подставку поместите по 7 кювет. 3 кюветы для пробы с разве- дением 1:0, 4-7-я кюветы для разведений исследуемой пробы 1:1, 1:2, 1:4, 1:8. На каждой кю- вете зафиксируйте соответствующее разведение.

И. 12 В каждую кювету поместите 0,1 мл рабочей суспензии “Эколюм”. В кюветы

№ 1-3 поместите по 0,9 мл исследуемой пробы, в кювету № 4 – 4,5 мл воды и 4,5 мл пробы; в кювету № 5 – 6 мл воды и 3 мл пробы; в кювету № 6 – 7,2 мл воды и 1,8 мл пробы; в кювету

№ 4 – 8,0 мл воды и 1,0 мл пробы. Объем добавляемой суспензии бактерий в контрольную и опытные кюветы должен быть одинаковый.

И. 13 Измерьте свечение контрольной пробы, поместив контрольную кювету в кювет- ное отделение и нажав кнопку “контроль”. Измерьте свечение опытной пробы, поместив кювету с исследуемой пробой в кюветное отделение и нажав кнопку “проба”. Таким образом последовательно проведите измерение интенсивности свечения кювет: контроль – кювета № 1, контроль – кювета № 2, контроль – кювета № 3. Нажмите кнопку “токсичность” – высвечи- вается среднее значение токсичности исследуемой пробы, нажмите кнопку “ошибка” – выс- вечивается значение стандартного отклонения значения токсичности по измеренным значе- ниям. Запишите полученные значения.

И. 14 Измерьте значения токсичности стандартных разбавлений исследуемой пробы. Для этого нажмите кнопку “ЕС”. Измерьте интенсивность люминесценции контрольной про- бы и кюветы № 4 (разведение 1:1), нажмите кнопку “токсичность” – запишите значение ток- сичности, нажмите кнопку “G-функция” – запишите значение G-функции. Аналогично про- ведите измерения токсичности проб № 5, 6, 7. После окончания измерений нажмите кнопку

“ЕС20”, затем “ЕС50” – высвечиваются соответствующие значения. Запишите полученные значения.

И. 15 Заполните протокол биотестирования по форме приложения Г.

И. 16 Результаты определения токсичности проб в рассматриваемом примере приво- дятся в табл. И. 1.


 


 

Таблица И. 1


 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

27

 

Результаты измерения токсичности


 

image

ПРИЛОЖЕНИЕ К

(обязательное)


 

image

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ И МЕТРОЛОГИИ

(ГОССТАНДАРТ РОССИИ)


 

СЕРТИФИКАТ

об утверждении типа средств измерений PATTERN APPROVAL CERTIFICATE OF MEASURING INSTRUMENTS

RU.C.31.003.A

 9842


 

Действителен до “01” мая 2006 г.


 

Настоящий сертификат удостоверяет, что на основании положительных резуль- татов испытаний утвержден тип приборов экологического контроля “Биотокс-10”


 

image

наименование предприятия-изготовителя


 

ОАО Холдинговая компания “Электрозавод”, г. Москва,

наименование средства измерений


 

image

который зарегистрирован в Государственном реестре средств измерений под № 21063-01 и допущен к применению в Российской Федерации.

Описание типа средства измерений приведено в приложении к настоящему сертификату.


 

image

Заместитель Председателя Госстандарта России

Заместитель Председателя Госстандарта России


 

В.Н. Крутиков “13” 04 2001 г.

Продлен до


 

image

rOCYMPCTBEHHhlH KOMIITET POCCIIHCKOH <l>E.II.EPAil_IIII ·

no CTAHl(APTIIJAQIIII H METPOJIOrIIII

YPAJibCKIIB HAYlfrl.0- MCCJIEOBATEJibCKIIB MHCTIITYT METPOJI01MM-

image

10CYAAPCTBEHHhll HAYlffihit'I METPOJIOf WIECKilli UEHTP

THE URALS SCIENTIFIC RESEARCH INSTITUTE OF METROLOGY- STATE SCIENTIFIC

METROLOGICAL CENTRE

620219, EKaTepm16ypr, rcrr-824, YII.KpacHoapMeHCKM,4

4,Krasnoanneyskaya st., Ekaterinburg,

620219 RUSSIA

<flaKc: (3432)55-20-39

TeJie<jlott:(3432)55-26-l 8 Email:(a) lamsis.mplik.ru.

Fax: (3432)55-20-39

Phone:( 3432 )55-26-18

Email:(a) lamsis.mplik.ru.

image


 

CBII):I:ETEJI.bCTBO .N!! 01.19.231/2001

CERTIFICATE

06 aTTeCTaUHH MeTOAHKH


 

Mero,n:MKa onpeOeJZeHu5l uHme2paJZbHOf.1. moKCU lJHOcmu noeepxHocmH bZX npecH bZX , 2pyHmOBbIX, numbeBblX, cmolJHblX u ol.JuuteHHbZX cmolJHbZX eoo. eoOHbZX :JKcmpaKmoe

o6beKmOB OKpy:JICQIOU{ eU cpeObl c ucnOJlb308GHUe.M mecm-06beKma 6UOJll0AtUllCC­ lf eHmH blX .l'vtUKpoopzaHU3.l'vt08 «3KOJllOAt »,

pa.3pa6oTaHHa5! 000 HTIJ "3Ko!lo211ttecKM nepcneKnmea ". 2. MocKea u pe2!lw.teHmupoeaHHM e

paH2e flHD </J ... ... ... ...

arreCTOBaHa B COOTBeTCTBlllI C rOCT P 8.563-96.


 

ArreCTaum1 ocymeCTBJieHa no pe3yJihTaTaM Atempo!102uttecKozl :JKcnepmuJbl Atamepuarwe no pa3- pa6omKe AtemoiJuKu.


 

B pe3yJibTaTe aTTeCTaUIIlI yCTaHOBJieHO, qTo MeTO,[(lIKa o6nanaeT cne.n:yIOUlHMlI OCHOBHbl MH MeT­ pOJIOIHYeCKHMli xapaKTepttCTII KaMtt:


 

1. yCJIOBll51 6IIOTeCTHpOBaml51


 

image

QfaeKT TOKClIKOJIOf'llqecKOI O TioBepxHOCTHbi e npeCHbie, rpyHTOBbie, nIITbeBhie, CT04Hble, KOHTpOJ15l OYIIUleHHbie CTOqHbie BO,[(bl, BOllHbie 3KCTpaKTbl ll3 o6beKTOB OKpy)!(afOUleH cpellbl (nOYBa, OTXOllbl npOH3BOllCTBa H noTpe6-

JieHll7l)

TecT-o6beKT Kynhrypa JIIOMIIHecueHTHbIX reHHO-IIH)!(ettepttbIX 6aKTepui1 Escherichia coli(TeCT-cttcTeMa «3KOJIIOM»)

MonenhHbIH TOKCIIKaHT CepHOKIICJibIH UIIHK 7-BOllHbIH (ZnS04 7H20) c MaCCOBOH

nM

 

KOHUeHTpautteH OT 1.14 no 1.36 Mrl 3

3

 

KottrpOJibHa5! npo6a )];ttCTlIJIJittpOBaHHa5! BO,lW c pH 7.0-7.4 B o6beMe 0. 9 CM H

3

0. 1 cM pa6oYei1 cycneH3IIH TecT-06beKTa

06mue rpe60BamU1 K npoueny- KonIIYecTBO KOHTPOJibHbIX npo6 - He Mettee 5

pe 6uoTeCTupoBaHm1 KonIIqeCTBO naparrneJibHbIX onpeneneHHH onhITHbIX npo6 - 5

BpeM.51 3KCn03l1UHII npo6 - 30 MHHYT


 

2. Ha11Mettosam1e onpe.uem1eMoro noKa.3aTem1, 3Ha'-lett11R xapaKTep11cT11K11 OTHOCHTeJlbHOtt no­ rpewttoCTH l1 HOpManrna onepanrnttoro KOHTpOM CJIYl.!attHOtt COCTaBJ151lOil{ett OTHOCHTeJlbHOtt norpewttocTH (socnpott3BO.UHMOCTH) npu .uosepTeJlhHOtt sepoRTHOCTH P=0.95


 

Onpe.uem1eMbitt noKa.3aTeJ1b

Htt.ueKc TOKCH'IHOCT11 (OTHOCHTeJlbHOe pa.311wrne HHTeHCHBHO-

CTH 611omoM1rnecueHTHOCTliKOHTpOJlbHOtt l1 OnbITHOtt npo6b1),

T

XapaKTepuCTuKa norpewHOCTH

(rpaHttUbI, B KOTOpb!X HaXO.UllTCJI

norpeWHOCTb), ± O,%


 

19.6

XapaKTep11CT11Ka c11yqafittoli cocTasmuomeli norpewHOCTH (cpe.uttee KBa.upanrqecKoe orKJJo- HeHtte cnyqaH.ttoH. cocraBmnoeH.

norpewttocrn) cr(cS), %


 

10.0

HopMaT11B onepanrnttoro KOH- Tpomi: socnpou3so.uuMocTu, D,

OTH. %


 

27.7


 


 

  1. ,Uarn BbI.Ua'IH CBH.UeTeJibCTBa 12.01.2001 r. CpoK .uelicrnuR .uo 12.01.2006 r.


     

    3aM.m1peKTopa no ttayYHOH pa6oTe

    image

    H.E.,Uo6posuttcKHH

    БИБЛИОГРАФИЯ


     

    1. Методика экспрессного определения токсичности воды с помощью люминесцентно- го бактериального теста “Эколюм”: Методические рекомендации. – М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000.

    2. Определение общей токсичности почв по интенсивности биолюминесценции бакте- рий: Методические рекомендации. – М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000.

    3. Определение токсичности химических соединений, полимеров, материалов и изде- лий с помощью люминесцентного бактериального теста: Методические рекомендации. – М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2000.

    4. Руководство по определению методом биотестирования токсичности вод, донных отложений, загрязняющих веществ и буровых растворов. – М.: РЭФИА, НИА – Природа, 2002.


 

image


 

ОКС 75.020


 

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: СТРОИТЕЛЬСТВО СКВАЖИН, БУРОВЫЕ ОТХОДЫ, БУРО- ВОЙ РАСТВОР, МЕТОДЫ ОЦЕНКИ ТОКСИЧНОСТИ, МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ, ЛАБОРАТОРНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ, СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ.


 

image


 

image


 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 

Корректор В.И. Кортикова

Компьютерная верстка А.И. Шалобановой


 

image

ИД № 01886. Подписано в печать 06.06.2005 г. Формат 60x84/8. Гарнитура Ньютон С. Тираж 100 экз. Усл. печ. 4,75 л. Уч.-изд. л. 3,9. Заказ 45.


 

image

ООО “ИРЦ Газпром” 117630, Москва, ул. Обручева, д. 27, корп. 2. Тел.: (095)719-64-75, 719-31-17.


 

image


 

33

 

Отпечатано в ЗАО “Издательский Дом Полиграфия”


 


 

image

34

 

СТО Газпром РД 2.1-129-2005

 


 

image


 

image